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土霉素是畜禽养殖业中使用最广泛的一种广谱抗生素之一。由于价格低廉被大量用于畜禽饲料中预防疾病或促生长剂,导致其在环境中大量的残留,引起耐药菌及抗性基因的产生,对人类的健康构成严重威胁。目前生物降解因其具有成本低廉、降解彻底等优点,成为了国内外研究去除抗生素残留的热点之一。为去除土霉素在环境中的残留,本论文采用富集筛选法从长期受土霉素污染的土壤中获得土霉素降解菌,通过形态观察以及ITS测序对降解效果最好的菌株进行鉴定,并对降解菌在培养基中的降解特性及其在人工污染土壤中的降解行为进行研究,得到的结果如下:(1)通过富集驯化法筛选到9株能够以土霉素为唯一碳源生长的菌株。在流动相为草酸(0.01 mol·L-1)-乙腈-甲醇(76:16:8,V/V/V),土霉素回收率范围为78.07%~94.63%以及平均变异系数范围为2.48%~6.67%的条件下,采用高效液相色谱法对菌株进行土霉素降解能力的检测,表明菌株Y-1、菌株Y-3和菌株Y-7对土霉素有明显的降解效果,降解率分别为7.79%、10.42%和31.86%,其中降解土霉素效果最好的是菌株Y-7。根据菌株Y-7在培养基上生长情况和镜检孢子情况,初步鉴定该菌为真菌。利用PCR扩增病原菌核糖体ITS基因区,测序获得一段长度为522bp的ITS序列,通过BLAST序列比对,确定菌株Y-7为曲霉属(Aspergillus sp.)真菌,同源性达到100%。(2)菌株Y-7在液体培养基中降解土霉素的最佳培养条件是:温度40℃,pH值为6,培养时间7d,装液量2%,底物浓度200 mg·L-1。土霉素降解菌Y-7表现了较高的耐温性,且pH值范围在中性的条件下对土霉素的降解效果较好。其中,随着温度的升高和底物浓度的增大,土霉素在菌株Y-7的作用下降解速率均加快,而菌株Y-7对土霉素的降解率随着pH值增大、培养时间延长及接种量增加均表现出先增大后降低的趋势。(3)利用HLB固相萃取小柱提取土壤中土霉素,测得的回收率范围为63.16%~80.20%,变异系数范围为2.01%~9.53%(<15%),因此该方法对土壤中土霉素的提取有一定的准确性。在土霉素初始浓度为50 mg·kg-1的土壤中,接种菌株Y-7的土霉素含量较不接菌的空白对照明显降低,降解率达30.63%,表明降解菌Y-7在土壤中对土霉素有一定的降解效果。