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宫颈癌（Cervicalcarcinoma，CC）是全球妇女恶性肿瘤中仅次于乳腺癌的第二位常见恶性肿瘤，是发展中国家的妇女主要肿瘤类型。世界卫生组织（WHO）估计，我国每年新发病例约13.1万，约占世界宫颈癌新发病例的28.8％。近年来，宫颈癌呈现年轻化城市化的趋势，其预防与治疗已成为相关领域的研究热点。HPVE5和HPVE6是HPV病毒的两种重要转化基因表达产物，HPVE6是关键的致癌蛋白，HPVE5则可能在病毒和转化细胞的免疫逃逸机制中发挥重要作用。本研究运用多种生物技术方法，构建能够表达HPVE5和HPVE6基因的哺乳动物细胞模型，为下一步深入研究其功能奠定基础。
本研究运用PCR技术从HPV病毒基因组中克隆制备了两种在我国最为常见的高危型HPV（HPV-16、HPV-58）的E5编码基因片段，采用DNA重组技术构建能够高效表达两种亚型HPV的E5基因的真核表达载体pcDNA3.1/V5-His-TOPO/HA-HPV16E5和pcDNA3.1/V5-1-His-TOPO/HA-HPV58E5；并利用基因转移技术将构建的真核表达载体转入宿主细胞HEK-293和C33A细胞系中；采用RT-PCR、Western.blot和免疫荧光技术鉴定目的基因的表达情况。结果显示：本研究中建立的两种HPV亚型E5基因的真核表达载体被成功转入宿主细胞，并且确实能够在CMV启动子的指导下于人源细胞中表达相应的目标产物，为下一步研究HPVE5对膜结合免疫分子的影响及HPV免疫逃逸机制奠定基础。
另外，本研究还运用PCR技术从HPV病毒基因组中获得了我国特有高发的致宫颈癌高危型HPV-58的E6癌蛋白编码基因片段，采用重组DNA技术构建能够高效表达该基因产物的真核表达载体pcDNA3.1/V5-His-TOPO/HA-HPV58E6；并利用基因转移技术将构建的真核表达载体转入宿主细胞HEK-293中，利用G418抗性加压筛选获得了稳定转染细胞株；通过后续的RT-PCR、Western-blot技术的鉴定，验证了所建立的新型细胞HEK-293/pcDNA3.1/V5-his-TOPO/HA-HPV58E6能够稳定且高效地表达HPV-58的E6癌蛋白，这将为后续的HPV-58E6癌抗原的HLA限制性CTL表位的研究和相关宫颈癌治疗性疫苗的评价搭建实验平台。