淫羊藿黄酮水解产物化学成分的研究

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淫羊藿具有补肾阳,强筋骨,祛风湿的功效,前人研究多集中于淫羊藿黄酮成分及其活性的研究。而人体可能以低糖苷或苷元形式吸收入血,为获得低糖基次生苷和苷元形式的黄酮试验材料及苷元产品,本论文用化学水解方法对淫羊藿黄酮进行了水解,并对水解产物次生苷和苷元的制备方法进行了研究。采用HPD100大孔吸附树脂吸附和聚酰胺富集,乙醇/水梯度洗脱工艺制备了水解原料淫羊藿苷和淫羊藿总黄酮,用HPLC-ESI/MS对总黄酮的组成成分进行了化学表征,通过对淫羊藿黄酮化合物的质谱分析可知,淫羊藿黄酮类化合物在ESI/MS的正离子模式下,一般是3位连接的糖基先丢失,7位的糖基才能裂解丢失,但在负离子模式子下糖基断裂的顺序却正好相反。通过质谱分析推断7位上有糖基取代的淫羊藿黄酮在负离子模式下可能会结合H20分子形成非共价复合物,但是最终结论还需要进一步的实验来确定。用HPLC-PDA-UV方法分析水解产物的变化,总结了水解条件对淫羊藿黄酮水解的影响,其中水解介质对水解产物的组成起主要作用,酸的浓度和水解时间对水解也起重要作用。淫羊藿苷水解,水解介质是甲醇溶液,酸的浓度为0.5mol· L-1,水解反应时间是30min,冷却沉淀即可得到纯度90%的淫羊藿次苷Ⅰ;水解介质是甲醇溶液,酸的浓度为2.5mol· L-1,水解反应的时间是5h,冷却沉淀即可得到纯度90%的脱水淫羊藿素。淫羊藿总黄酮水解,得到了五个化合物的水解产物,利用色谱方法分离纯化出这五个化合物。采用质谱对化合物进行结构表征,五种化合物中有二个低糖基次生苷和三个苷元,低糖苷分别是朝藿苷D(Caohuodise D),茂汶淫羊藿苷A(Platy petaloside A),苷元分别是水合淫羊藿素(Icaritin),心叶淫羊藿素(Brevicornin)。脱水淫羊藿素(Anhydroicaritin)。盐酸水解淫羊藿黄酮化合物,3位上的糖基先水解掉(一般是鼠李糖基),然后是7位上的糖基被水解掉。水解原料中的淫羊藿黄酮类化合物多为一些8-异戊烯基取代的黄酮苷类成分,用盐酸水解淫羊藿黄酮类化合物,得到的水解产物成分复杂,主要有8-异戊烯基取代的次生苷和苷元,其次还有8-异戊烯基发生变化的次生苷和苷元。本文初步探讨了淫羊藿黄酮苷的酸水解规律,该方面仍需深入研究和探讨。
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