道地药材银柴胡组培研究

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为解决银柴胡种子种苗繁殖系数低、种源混杂等问题。本次研究借助组织培养技术,通过对外植体处理,光照处理,培养基筛选,根系鲜质量及总黄酮含量测定方面的研究,旨在研究银柴胡通过组培,快速繁殖幼苗,增加繁殖系数,为银柴胡高效快繁提供理论支撑,为解决银柴胡人工栽培提供技术支撑,并为银柴胡栽培苗、组培苗及野生苗种源差异性研究提供前期依据。结果如下:1.外植体(腋芽与茎段)最佳灭菌条件为75%酒精30s,0.1%氯化汞60s。灭菌试剂与灭菌时间交互作用下,腋芽灭菌效果成活率66.7%,污染率30%,死亡率3.3%;茎段灭菌效果成活率56.7%,污染率36.7%,死亡率6.6%。2.腋芽竖直插入的接种方式优于水平放置,出愈率为83.3%,死亡率13.3%,成活褐化率4.8%;茎段水平放置的接种方式优于竖直插入,出愈率为80.6%,死亡率为16.7%,活褐化率均为3.3%。3.最优光照处理为暗处理14d后再光照强度80001x或10000lx下光照12h/d。愈伤组织出愈率只受到暗处理时间的影响,暗处理14d出愈率最佳,为74.4%;愈伤组织褐化率受暗处理时间与光照强度影响,两因素无交互作用,暗处理14d,光照强度8000lx或100001x褐化率最低。4.基础培养基MS最佳,腋芽成活率76.7%、茎段成活率73.3%,外观色泽翠绿。愈伤组织诱导最佳培养基MS+4mg·L-1NAA+1mg·L-16-BA,腋芽与茎段出愈率100%。愈伤组织未能诱导出不定芽,外植体诱导不定芽培养基MS+1.5mg·L-16-BA+0.2mg·L-1NAA,分化系数5.8,且外植体色泽鲜艳,生长较快。生根诱导培养基MS+0.3mg·L-1NAA+0.1mg·L-16-BA,生根率达86.7%。5.在MS+0.3mg·L-1NAA+0.1 mg· L-16-B配比下诱导愈伤组织产生根系根平均鲜质量最高0.29g。MS+1.5mg·L-1NAA+0.1mg·L-16-BA配比下诱导愈伤组织根系平均总黄酮含量达0.99mg·g-1,全部12个处理诱导生根测定组培根系总黄酮含量均值为:0.89mg·g-1。
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