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山羊胚胎干细胞(ESCs)和胚胎生殖细胞(EGCs)是克隆动物、转基因动物、制备生物反应器和组织工程等理想的候选细胞，然而至今没有成功建系的报道。本研究选用关中奶山羊胚胎和胎儿为试验对象，参照小鼠和人ESCs和EGCs建系的方法，系统比较了不同培养条件和传代方法对分离培养山羊ESCs和EGCs的影响，并对得到的细胞进行了一系列的检测和鉴定，主要获得以下结论：
1.本试验共超排处理了4只关中奶山羊采胚，共采集胚胎42枚，可用胚39枚，胚胎可用率为92.9％(39/42)，其中桑椹胚5枚，囊胚28枚，孵化囊胚6枚，平均每只山羊获得10.05枚胚胎。原代培养时分别采用全胚培养法、酶消化法和免疫外科法处理胚胎，观察不同发育阶段的胚胎在原代培养时使用不同的处理方法对贴壁率和传代培养的影响。发现原代培养时，全胚培养法的贴壁率最高，而囊胚最适合于山羊ESCs的分离培养，最高传至18代。
2.试验在传代培养时比较了机械法和酶消化法两种方法对山羊ESCs体外培养的影响，发现早期使用机械法传代有利于ESCs的增殖，而后期使用酶消化法传代有利于抑制ESCs的分化。本试验6代以前使用机械法传代，6代以后采用酶消化法传代，最高将山羊ESCs传至18代。
3.试验采用山羊的克隆胚胎和孤雌激活胚胎分离ESCs，发现两种胚胎的贴壁率很低，胚胎细胞增殖较慢，通过比较不同发育阶段胚胎的体外培养结果，发现早期桑椹胚的贴壁率稍高于囊胚，试验将ntESCs和pESCs细胞最高分别传至4代和2代。
4.试验对山羊ESCs进行了免疫组织化学染色和RT-PCR检测，表明其表达SSEA-1，SSEA-3，Nanog，Oct4，TERT和CD117。体外诱导分化试验证明山羊ESCs在体外经诱导可分化为心肌细胞，说明所获得的山羊ESCs具有ESCs的特性。
5.试验共得到30例山羊胎儿，以胎儿生殖嵴分离培养EGCs。发现以高糖DMEM为培养基，添加15％KSR的无血清培养体系比含15％FBS的培养体系更能维持EGCs的长期传代培养，传代次数较高，但经t检验，二者之间差异不显著(P>O.05)。而传代培养时，机械法最高传至10代，酶消化法最高传至5代，机械法更适合于传代培养，二者差异显著(P
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