α-葡萄糖苷酶抑制剂能抑制α-葡萄糖苷酶水解释放葡萄糖,从而降低机体中的血糖浓度,临床上多用作为治疗糖尿病的口服降糖药。DNJ(1-Deoxynojirimycin)即1-脱氧野尻霉素,对α-葡萄糖苷酶有强烈的抑制作用,是一种典型的α-葡萄糖苷酶抑制剂。本研究以DNJ为标准参考物,采用微孔板法检测α-葡萄糖苷酶抑制剂的半数抑制浓度(IC50值),并对该实验的最佳反应条件进行了摸索。结果表明:对于酶浓度,实验中所用批次酶的最适浓度范围为2.0-3.0mg/m L;对于检测波长,在405nm、450nm、492nm、520nm、630nm 5种条件下,520nm和492nm波长检测信号最强,两者强度相当,且检测强度均随着酶浓度的降低而降低;对于蔗糖底物浓度,合适范围应为20-40mM/L;对于反应时间,合适的范围应为20-30min。同时,也对该方法是否适用于测定豆豉提取物IC50值进行了验证。结论表明,在以豆豉提取物为样品的IC50值检测过程中:线性相关系数R2均大于0.98,满足方法的线性要求;精密度试验中,同一试验人员重复性结果良好,不同试验人员间结果的相对标准偏差满足不大于20%的要求;特异性试验中,能有效检测出豆豉提取物的IC50值,对四季豆提取物的检测无效;稳健性实验中,与安利美国研发实验室进行结果比较,安利中国生化分析实验室的结果平均值在两个实验室所有结果平均值的±20%范围内。所以,该法适用于豆豉提取物干粉的IC50值检测。