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恶性黑色素瘤是发病原因尚未明确的恶性肿瘤,转移早,预后差。当前治疗方法与其他恶性肿瘤类似,根据TNM分期进行手术切除、放疗及化疗等。但是由于恶性黑色素瘤早期发生血道转移的特点,手术切除甚至截肢术并不能取得明显的治疗效果。且恶性黑色素瘤分型不同,对放化疗的敏感性也不同,只有雀斑型恶性黑色素瘤对放疗有效。近年来,靶向治疗逐渐应用于各类恶性肿瘤的治疗中。比如,在乳腺癌的动物模型中,研究者借助外泌体作为药物载体将化疗药物直接作用于靶细胞,发现肿瘤细胞受到明显抑制。本实验借鉴其他恶性肿瘤的靶向治疗思路,用外泌体包装化疗药物阿霉素后作用于A375细胞(恶性黑色素瘤细胞),观察A375细胞的增殖情况,以验证外泌体在恶性黑色素瘤治疗中的有效性。外泌体是由多种细胞分泌的小囊泡,直径在10-100nm之间,囊内可含有少量细胞碎片等,是类似于细胞膜的磷脂双分子层结构。正常情况下,人体正常体细胞及肿瘤细胞均会分泌外泌体,本实验获得的外泌体均是通过293T细胞(转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞系)分泌提取的。通过293T细胞的培养,对实验组293T细胞进行i RGD-Lamp2b质粒的转染构建,使实验组分泌的外泌体为i RGD-外泌体;未经转染的对照组细胞分泌的外泌体为单纯的外泌体囊泡,囊泡表面无特异性结合蛋白。将两组外泌体在同等条件下采用电穿孔,包裹等量阿霉素后冻存。体外培养A375细胞(恶性黑色素瘤细胞系),分别将两组外泌体与A375细胞共培养,多个时间点观察A375细胞增殖情况。对比后发现,i RGD-外泌体-阿霉素比外泌体-阿霉素的增殖抑制效果更加明显。目的:观察i RGD外泌体整合阿霉素后对人恶性黑色素瘤细胞系A375增殖的体外影响。方法:将同等浓度的blank-Exosome及i RGD-Exosome在相同条件下电穿孔,使其装载相同浓度的阿霉素,两组外泌体与A375细胞共同孵育后,流式细胞仪检测两组的结合率,并分别计数24、48、72、96小时的细胞增殖情况。结果:对照组(blank-Exosome-Dox)与A375细胞结合8.4%,实验组(i RGD-Exosome-Dox)与A375细胞结合41.5%;计数细胞增殖情况,实验组的细胞增殖明显低于对照组。结论:i RGD-Exosome能装载阿霉素,更有效的抑制A375细胞的增殖。