研究背景和目的肠是重症急性胰腺炎（SAP）最常受累的脏器,与SAP诱发的全身炎症反应及氧化应激有关。SAP及其应激时的高血糖亦可导致组织氧化损伤。在治疗糖尿病时发现,西格列汀（SIT）通过抑制二肽基肽酶4（DPP4）活性降低血糖,和/或非酶作用减轻炎症反应,改善脏器功能。SIT的抗炎作用是否可以改善SAP肠粘膜屏障功能,从而减少SAP脓毒症的发生,及SIT是否通过Nrf2通路拮抗小肠粘膜氧化损伤,保护SAP肠功能均未得到证实。本研究旨在证明西格列汀可以通过Nrf2通路改善SAP小肠粘膜氧化/还原平衡,减轻炎症反应,为合理运用SIT治疗SAP相关性肠损伤提供理论依据。方 法1.C57BL/6 小鼠随机分成 4 组（CTRL、SAP、SAP+SIT100 和SAP+SIT200）,比较各组胰腺和小肠组织病理、血糖、血清IL-6、IL-1β浓度和淀粉酶、脂肪酶、DPP4活性、小肠组织MDA浓度和SOD活性、小肠组织DPP4和NF-κB mRNA与蛋白表达。2.对10%血清高糖（4.5 g/L）加0.01mg/ml胰岛素培养的大鼠小肠隐窝上皮细胞（IEC-6）进行分组处理,设磷酸盐缓冲液（PBS）、SIT、脂多糖（LPS）和LPS+SIT4组,比较细胞存活率、细胞内ROS荧光强度、IL-6、IL-1β和TNF-α mRNA与蛋白表达。3.野生型（WT）小鼠和Nrf2-/-（KO）小鼠随机各分成3组（CTRL、SAP和SAP+SIT200）,比较各组小肠组织病理、血糖、血清IL-6、IL-1β浓度和DPP4活性、小肠组织MDA浓度和SOD活性、小肠组织DPP4、NF-κB和Nrf2 mRNA与蛋白表达。结 果1.SIT对SAP模型小鼠炎症反应和小肠粘膜氧化损伤的影响与CTRL组相比,SAP组胰腺炎性细胞浸润和小肠粘膜损伤明显,血清IL-6、IL-1β浓度、淀粉酶、脂肪酶和DPP4活性升高,小肠组织MDA浓度、DPP4和NF-κB mRNA与蛋白表达升高,而SOD活性降低。结果显示,SAP模型导致小鼠全身炎症反应和小肠粘膜氧化损伤。与SAP组相比,SAP+SIT100组和SAP+SIT200组胰腺和小肠组织病理改善,血清IL-6、IL-1β浓度、淀粉酶、脂肪酶和DPP4活性降低,小肠组织MDA浓度、DPP4和NF-κB mRNA与蛋白表达降低,而小肠组织SOD活性升高。与SAP+SIT100组相比,SAP+SIT200组小肠组织SOD活性升高更明显,NF-κB mRNA与蛋白表达下降更明显。SAP+SIT100 组和 SAP+SIT200 组血清 IL-6、IL-1β浓度和 DPP4 活性、小肠组织DPP4 mRNA与蛋白表达无差异。四组血糖无差异。结果显示,SIT改善SAP模型小鼠炎症反应和小肠粘膜氧化损伤;增加SIT剂量进一步改善小鼠小肠损伤的修复作用和抑制DPP4酶活性相关性不密切。2.SIT对LPS诱导的IEC-6细胞氧化和炎症因子的影响IEC-6细胞经LPS刺激后,细胞存活率降低,细胞内ROS含量增加,IL-6、IL-1β、TNF-α的mRNA与蛋白表达均增加。LPS+SIT组和LPS组相比,细胞存活率提高,细胞内ROS含量减少,IL-6、IL-1β、TNF-α的mRNA与蛋白表达均降低。结果显示,西格列汀降低了 LPS诱导的IEC-6细胞的活性氧含量和炎症因子水平。3.SIT对SAP模型Nrf2-/-小鼠炎症反应和小肠粘膜氧化损伤的作用与WT-CTRL组相比,WT-SAP组小肠组织Nrf2 mRNA与蛋白表达水平降低。与WT-SAP组相比,WT-SAP+SIT200组小肠组织Nrf2 mRNA与蛋白表达水平升高。与KO-CTRL组相比,KO-SAP组血清DPP4活性、IL-6和IL-1β浓度明显升高,小肠组织MDA浓度升高,而SOD活性降低,DPP4和NF-κB mRNA与蛋白表达增高。与KO-SAP组相比,KO-SAP+SIT200组虽然血清DPP4活性降低,小肠组织DPP4 mRNA与蛋白表达下降,但小肠组织病理无差异,血清IL-6和IL-1β的浓度无差异,小肠组织MDA浓度、SOD活性和NF-κB mRNA与蛋白表达无差异。结果显示,SIT虽然可以抑制Nrf2-/-小鼠DPP4酶活性,但是没有改善其SAP模型炎症反应和小肠粘膜氧化损伤,说明SIT对小肠粘膜的抗炎抗氧化作用依赖其对Nrf2的激活,而与其DPP4酶抑制剂的功能相关性不密切。结 论本研究证明西格列汀通过激活Nrf2通路减轻SAP模型小鼠小肠粘膜氧化损伤,改善小肠粘膜氧化/还原平衡,降低小肠上皮细胞炎症因子表达,从而改善SAP相关小肠粘膜损伤,该作用和抑制DPP4酶活性相关性不密切。