论文部分内容阅读
目的:探讨在幼年大鼠肾间质微血管损伤过程中内抑素(endostatin, ENS)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)、CD31组织定位表达的趋势、相关性及其潜在的病理意义,以及用阿托伐他汀干预的效应。方法:(1)采用单侧输尿管结扎的方法制备实验性梗阻性肾小管间质损伤模型(UUO模型);3-4周龄幼年雄性SD大鼠72只,分为正常对照组(24只)、模型组(24只)、模型干预组(24只),于实验第1、3、7、14天每组各取6只大鼠,取病变肾脏石蜡包埋并切片;(2)HE染色观察肾小管萎缩扩张、间质微血管损伤情况;(3)Masson染色评价肾间质纤维化程度;(4)免疫组化方法检测大鼠肾组织ENS、VEGF及CD31的表达,并从时间和组织定位表达趋势上评价ENS、VEGF及CD31的相关性,探讨ENS在肾间质微血管损伤中的作用;(5)用SPSS16.0统计软件进行统计学处理。结果:(1)常规HE及Masson染色:正常对照组肾脏结构无明显病理改变;模型组术后术后3天即可见远端肾小管扩张,管周毛细血管减少,肾间质轻度水肿,术后7天近端肾小管扩张明显,间质中大量炎细胞浸润,部分小管上皮细胞变性坏死;第14天可见弥漫的肾小管基底膜增厚皱缩,胶原增多,纤维化明显,胶原纤维染色绿染面积增多,且不同时间点差异有显著统计学意义(P均<0.01)。模型干预组各时间点肾间质病变程度较模型组轻,但较对照组重(P均<0.01)。(2)免疫组化染色测定肾间质ENS、VEGF及CD31蛋白表达情况:?对照组:ENS蛋白弱表达于肾小球上皮细胞和肾小管周围毛细血管内皮细胞胞浆,肾小管上皮细胞内几乎无表达,各时间点差异无显著性(P均>0.05)。VEGF蛋白广泛表达于肾小球上皮细胞、肾小管上皮细胞及足突细胞,呈黄色颗粒状分布于细胞胞浆中,各时间点差异无显著性(P均>0.05);CD31蛋白广泛表达于肾小球内皮细胞和肾小管周围毛细血管内皮细胞中,呈黄色颗粒状分布于细胞胞浆中,各时间点差异无显著性(P均>0.05);②模型组:ENS蛋白术后1天在肾小管上皮细胞部位的表达渐增加,阳性信号强于对照组,且在间质中出现片状表达,随着实验时间的延续,病变的加重,上述表达趋势明显加强,7d时表达最强,后随病变的发展表达反而较前下降;VEGF术后7天,足突细胞未见阳性表达,部分肾小管上皮细胞胞浆中有弱阳性表达表达阳性程度弱于正常对照组;随着肾间质病理损伤程度加重,VEGF表达的阳性面积均呈显著递减,术后第14天,表达明显减弱;CD31术后第1天在肾小球内皮细胞和肾小管周毛细血管内皮细胞有表达,术后3天,CD31表达开始减弱随着肾间质病理损伤程度加重,肾小管周围毛细血管密度明显递减,术后14天表达减弱明显。三种蛋白表达各时间点组内比较差异有显著性(P均<0.01),各时间点与对照组比差异有显著性(P均<0.01);③模型干预组:ENS蛋白表达各时间点明显低于模型组,但高于对照组,差别有均有统计学意义(P均<0.01);CD31蛋白表达各时间点明显高于模型组,但低于对照组,差别有均具有统计学意义(P均<0.01)。(3)相关性分析:模型组ENS与VEGF及CD31之间相关系数r值均小于零,呈负相关关系,VEGF与CD31之间相关系数r值大于零,呈正相关关系(P均<0.01)。结论:本研究提示UUO幼鼠肾间质纤维化早期肾间质内ENS表达上调,VEGF与CD31表达下调,ENS与CD31及VEGF表达呈负相关,VEGF与CD31表达呈正相关。表明在幼年大鼠肾间质微血管损伤中ENS表达上调具有重要的致病意义,阿托伐他汀药物干预治疗后可影响上述各指标表达,从而表明阿托伐他汀可以调节肾间质ENS表达而达到一定程度上的延缓和/或治疗肾间质纤维化。