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目的:既往研究发现雌激素及G蛋白偶联受体30(G protein coupled receptor 30,GPR30)在多种疼痛模型中发挥重要作用,本实验研究雌激素、GPR30对大鼠慢性偏头痛模型头痛指标的影响,探讨雌激素、GPR30受体对慢性偏头痛的作用及其可能的机制。方法:大鼠行去卵巢术,术后7天每日查阴道涂片剔除有性周期的大鼠。剩余大鼠随机分5组,每组8只,行头颅硬膜外置管术。术后炎症汤反复刺激硬脑膜建立慢性偏头痛模型,连续给药14天。Vehicle组:每日腹腔注射磷酸盐缓冲液(Phosphate buffer saline,PBS)20mg/kg,其中含有二甲基亚砜(Dimethyl sulfoxide,DMSO),含量小于0.1%;IS组:每日硬膜外注射炎症汤2μL、腹腔注射PBS 20mg/kg,其中含DMSO,含量小于0.1%;E2组:每日硬膜外注射炎症汤2μL、腹腔注射雌二醇(estradiol,E2)1mg/kg;G1组:每日硬膜外注射炎症汤2μL、腹腔注射G1(GPR30受体特异性激动剂)20mg/kg;G15组:每日硬膜外注射炎症汤2μL、腹腔注射E2 1mg/kg、G15(GPR30受体特异性拮抗剂)5mg/kg。给药14天内每日用Von Frey纤维丝测大鼠眶周、后爪痛阈值,观察行为学评分;末次给药后取大鼠血清检测雌二醇以及白介素-10(Interleukin-10,IL-10)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)的含量;末次给药后取材,应用免疫组化、Western blot、RT-PCR等方法检测三叉神经节(Trigeminal ganglion,TG)、丘脑内的GPR30、降钙素基因相关肽(Calcitonin gene-related peptide,CGRP)、c-fos的蛋白表达情况及其m RNA水平的变化。结果:1.与Vehicle组比,IS组大鼠眶周、后足痛阈值降低,眶周痛阈值从第三天开始明显下降,后爪痛阈值从第四天开始明显下降。给药14天后,眶周、后爪痛阈值趋于稳定。与Vehicle组比,IS组大鼠自主行为反应评分升高(P<0.05)。与IS组相比,E2组、G1组大鼠眶周、后足痛阈值高,大鼠行为学评分低(P<0.05)。结果提示反复硬脑刺激能成功模拟慢性偏头痛的发作,说明造模成功。2.去卵巢手术后7天,各组大鼠血清雌激素水平无明显差异。末次给药后,与Vehicle组比,IS组的雌激素水平无明显变化。E2组、G15组血清内雌激素的水平比IS组显著升高(P<0.05),结果提示雌激素能够显著升高大鼠体内雌激素的水平。3.末次给药后取血,与Vehicle组相比,IS组IL-10减低、TNF-α升高、TNF-α/IL-10升高(P<0.05)。与IS组相比,E2组、G1组IL-10含量升高,TNF-α含量降低,TNF-α/IL-10降低(P<0.05)。G15组TNF-α含量比E2组升高(P<0.05),IL-10含量降低不明显,无统计学差异。4.末次给药后取材,与Vehicle组比,IS组在TG及丘脑内CGRP表达升高,c-fos表达升高(P<0.05),GPR30表达无明显差异;与IS组比,E2组和G1组在TG及丘脑内GPR30表达增多,CGRP表达降低、c-fos表达降低(P<0.05)。与E2组比,G15组在TG及丘脑内GPR30表达减少,CGRP表达增多,c-fos表达增多(P<0.05)。结论:1.外源给予一定剂量的雌激素、激活GPR30可调节大鼠眶周和后爪痛阈值以及TG、丘脑内c-fos、CGRP的表达,雌激素及GPR30对大鼠慢性偏头痛有镇痛效果。2.外源给予一定剂量的雌激素及激活GPR30影响IL-10和TNF-α的水平,炎症因子平衡很可能是雌激素及GPR30受体参与慢性偏头痛的重要作用机制。3.一定剂量的雌激素、G1增加TG及丘脑的GPR30表达量,对模型大鼠有镇痛作用,G15抑制GPR30的表达,影响雌激素对模型大鼠头痛的阻断作用,雌激素通过GPR30来发挥对慢性偏头痛的调节作用。