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目的:观察过表达Derlin-1的RLE-6TN细胞经香烟烟雾提取物(cigarette smoke extrac,CSE)不同时间处理后的凋亡率的变化。探索其与内质网应激诱导性凋亡(Endoplasmic reticulum stress induced apoptosis,ERSIA)的关系。方法:携带Derlin-1编码序列的慢病毒转染RLE-6TN细胞过表达Derlin-1基因;转染空白慢病毒作为对照组;制备CSE;用10%CSE处理对照组、过表达组细胞0h、3h、6h、12h、24h;流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率;Western blot技术检测各组细胞Derlin-1、IRE1、p-IRE1、JNK、P-JNK,CHOP、caspase12蛋白的表达;Realtime-PCR技术检测各组细胞Derlin-1m RNA的表达。结果:1.慢病毒过表达Derlin-1稳定株的检测:Western blot检测过表达组Derlin-1蛋白的表达较对照组增加,差异有统计学意义(p<0.05)。Realtime-PCR检测Derlin-1m RNA的表达结果与Western blot结果一致。2.流式细胞技术检测细胞凋亡:用10%CSE处理对照组、过表达组细胞0h,3h,6h,12h,24h后收集细胞,用Annexin V-APC/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒处理后在流式细胞仪上检测细胞凋亡率。对照组及过表达组凋亡率随着处理时间延长而增加,每组各时间点之间两两比较差异均有统计学意义(p<0.05)。过表达组凋亡率较对照组均明显降低,同一时间点的两组比较差异均有统计学意义(p<0.05)。3.Derlin-1在各组细胞中的表达:Western blot结果显示对照组Derlin-1的表达随CSE处理时间的延长呈逐渐增加的趋势,且组与组之间差异均有统计学意义(p<0.05)。在过表达组,Derlin-1的表达同样呈现出随时间延长的增长趋势,各组间的两两比较均有统计学差异(p<0.05)。但每组较对照组表达量明显升高,差异具有统计学意义(p<0.05)。Realtime-PCR检测两组Derlin-1m RNA的表达结果与Western blot结果一致。4.Derlin-1对ERS通路的影响:Western blot结果显示在对照组及过表达组中总的IRE1的表达在各时间点的变化不大,差异没有统计学意义(p>0.05)。两组的p-IRE1均有随处理时间的延长呈现增加趋势,每组各时间点的比较具有统计学意义(p<0.05)。但过表达组的p-IRE1的表达量较对照组有所下降,差异具有统计学意义(p<0.05)5.Derlin-1对ERSIA通路的影响:Western blot结果显示在对照组和过表达组中总JNK的表达量在各时间点的表达无明显变化,差异无统计学意义(p>0.05)。p-JNK与CHOP的表达量在两组中均有逐渐增加的趋势,呈时间依赖性,每组各时间点两两比较差异具有统计学意义(p<0.05)。两种蛋白过表达组较对照组表达量均下降,差异具有统计学意义(p<0.05)。caspase12的表达量在对照组从3h升高,12h达高峰,24h有所下降,但仍高于0h组,各时间点的两两比较差异有统计学意义(p<0.05)。在过表达组中,caspase12的表达随时间的延长而增加,但各时间点表达量较对照组均下降,且差异有统计学意义(p<0.05)。结论:CSE诱导RLE-6TN细胞发生ERS,促进ERSIA的发生。Derlin-1的上调可以缓解ERS,保护细胞免于凋亡。