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白僵菌Beauveriabassiana(Bals.)Vuillemin是一种半知菌类的广谱性昆虫病原真菌。它寄主的范围非常广泛,并且具有很强的感染能力、很好扩散流行性、不污生态染环境的特点,同时它生产简单,原料非常经济。随着过度的使用化学农药,环境问题越来越严重,作为主要的生防菌剂之一,白僵菌在生产应用中越来越受到人们的重视。白僵菌是一种真菌性杀虫剂,为了提高其杀虫效果,本文针对球孢白僵菌BbⅢ进行复合诱变选育、诱变株发酵条件优化、及其林间防效研究。主要结果如下:
(1)采用紫外线和微波对球孢白僵菌BbⅢ进行复合诱变,通过产孢量、几丁质酶活指标筛选我们得到3株优良菌株,测试了3株优良菌株对油茶象甲试虫的毒力效果。筛选获得最佳诱变菌株CB-27,其产孢量是原菌株的2.81倍,几丁质酶活力也明显高于原菌株,高活力几丁质酶产生菌株CB-27对油茶象甲均表现出了一定的致病力,随着处理时间的延长,校正死亡率逐渐真大。处理第6天时,CB-27菌株对油茶象甲的校正死亡率达86.83%,明显高于出发菌株。
(2)优化球孢白僵菌CB-27发酵的条件。用单因素实验的方法测出其各个因子的最适范围。根据最佳筛选实验确定的各因素的作用效果设计了最陡爬坡实验,对玉米粉浓度、含水量、接种量、发酵温度进行四因素五水平响应分析。通过响应面分析,优化球孢白僵菌CB-27固态发酵的条件,得出固态发酵最佳条件是:玉米粉8.21g·L-1,水分38.47%,接种量10.31%,发酵温度25.35℃,在此条件下球孢白僵菌CB-27的产孢量达到了11.853(×1010Spores·g-1),较优化前提高了3倍。
(3)通过林间施菌、笼套法测定防治效果,调查防治后油茶植株的虫口数和油茶果新增受害率,综合评价白僵菌林间防治油茶象甲的效果。通过测定菌株BbⅢ、紫外诱变株Uv7和复合诱变株CB27的林间防效,进一步确定了复合诱变菌株CB27对油茶虫害(油茶象甲)具有高效的防治作用。结果表明在施菌6天后,C3处理(108个·ml-1的CB27)的油茶象甲死亡率达到了83.4%,防治效果为79.9%,虫口减退率为81.7%。防治后各个处理的虫口数和油茶果新增受害明显下降,其中C1、C2、C3下降最多,处理以后的虫口数分别是6.1、4.1、4.3头·株-1;其中C1、C2和C3在防治期间的新增受害率为5.2%、5.3%和5.0%,均远低于对照组CK的15.2%,说明防治效果十分显著。其中相同浓度下防治效果和感染率都存在这样的关系:C>B>A,在都使用CB27的情况下,C3(108个·ml-1)>C2(107个·ml-1)>C(106个·ml-1),进一步说明了复合诱变后的菌株对油茶虫害(油茶象甲)具有更好的防治作用。
(1)采用紫外线和微波对球孢白僵菌BbⅢ进行复合诱变,通过产孢量、几丁质酶活指标筛选我们得到3株优良菌株,测试了3株优良菌株对油茶象甲试虫的毒力效果。筛选获得最佳诱变菌株CB-27,其产孢量是原菌株的2.81倍,几丁质酶活力也明显高于原菌株,高活力几丁质酶产生菌株CB-27对油茶象甲均表现出了一定的致病力,随着处理时间的延长,校正死亡率逐渐真大。处理第6天时,CB-27菌株对油茶象甲的校正死亡率达86.83%,明显高于出发菌株。
(2)优化球孢白僵菌CB-27发酵的条件。用单因素实验的方法测出其各个因子的最适范围。根据最佳筛选实验确定的各因素的作用效果设计了最陡爬坡实验,对玉米粉浓度、含水量、接种量、发酵温度进行四因素五水平响应分析。通过响应面分析,优化球孢白僵菌CB-27固态发酵的条件,得出固态发酵最佳条件是:玉米粉8.21g·L-1,水分38.47%,接种量10.31%,发酵温度25.35℃,在此条件下球孢白僵菌CB-27的产孢量达到了11.853(×1010Spores·g-1),较优化前提高了3倍。
(3)通过林间施菌、笼套法测定防治效果,调查防治后油茶植株的虫口数和油茶果新增受害率,综合评价白僵菌林间防治油茶象甲的效果。通过测定菌株BbⅢ、紫外诱变株Uv7和复合诱变株CB27的林间防效,进一步确定了复合诱变菌株CB27对油茶虫害(油茶象甲)具有高效的防治作用。结果表明在施菌6天后,C3处理(108个·ml-1的CB27)的油茶象甲死亡率达到了83.4%,防治效果为79.9%,虫口减退率为81.7%。防治后各个处理的虫口数和油茶果新增受害明显下降,其中C1、C2、C3下降最多,处理以后的虫口数分别是6.1、4.1、4.3头·株-1;其中C1、C2和C3在防治期间的新增受害率为5.2%、5.3%和5.0%,均远低于对照组CK的15.2%,说明防治效果十分显著。其中相同浓度下防治效果和感染率都存在这样的关系:C>B>A,在都使用CB27的情况下,C3(108个·ml-1)>C2(107个·ml-1)>C(106个·ml-1),进一步说明了复合诱变后的菌株对油茶虫害(油茶象甲)具有更好的防治作用。