FTY720靶向鞘氨醇-1-磷酸干预STAT3通路抑制肝癌的研究

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目的本实验研究新型免疫抑制剂FTY720在体外及体内对肝细胞性肝癌增殖侵袭能力的作用,并初步探讨其作用机制,为FTY720在抗肝细胞性肝癌临床应用方面提供一定的理论基础。方法1、利用MTT法比较不同浓度(0μM-20μM)的FTY720对SMMC-7721及Huh7细胞增殖的影响;2、利用划痕实验及Transwell实验测定不同浓度(0μM-10μM)的FTY720对SMMC-7721细胞迁移侵袭能力的影响;3、Western blot方法检测不同浓度FTY720(0μM-10μM)作用于SMMC-7721及Huh7细胞后对S1PR1.STAT3等促肿瘤增殖迁移相关信号通路的影响;4、ELISA法检测不同浓度FTY720(0μM-10μM)又寸SMMC-7721及Huh7细胞分泌促肿瘤细胞因子1L-6的调控作用;5、建立人肝癌细胞裸鼠肝脏原位移植瘤模型,成瘤后随机分为对照组及FTY720治疗组,2周后处死,观察肿瘤大小及肝内转移情况。结果1、MTT法示FTY720对SMMC-7721.Huh7细胞的增殖有明显的抑制作用。随着浓度的加大,抑制效果更明显;2、FTY720能够显著抑制SMMC-7721细胞的迁移和侵袭能力,划痕愈合能力受到明显抑制,且穿过Transwell小室的细胞呈剂量依赖性的降低(P<0.05);3、FTY720剂量依赖性的降低S1PR1蛋白含量同时显著抑制STAT3的磷酸化;4、FTY720能够剂量依赖性的抑制SMMC-7721及Huh7细胞分泌IL-6;5、FTY720在肝癌原位移植瘤模型中可以显著抑制肿瘤的生长并减少肝内转移的发生。结论1、FTY720能够抑制肝癌细胞的增殖、迁移、侵袭及转移能力;2、其抗肿瘤能力是通过抑制S1PR1作用于下游STAT3通路引起的;3、对STAT3通路的影响可能与其抑制肝癌细胞IL-6分泌有关。
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