人源轮状病毒在胡萝卜中的表达

来源 :甘肃农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:caikesbad
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本实验利用胡萝卜作为生物反应器受体生产轮状病毒外壳蛋白VP6,VP7。通过PCR,RT-PCR,Western Blot,ELISA检测整合有轮状病毒外源基因的胡萝卜植株,即从基因水平到蛋白水平逐步检测。并将蛋白水平上表达有轮状病毒外壳基因的胡萝卜植株免疫小鼠,免疫方法采用注射免疫和灌胃免疫。1提取胡萝卜DNA进行PCR分析,表明VP6,VP7,VP7-U基因都已整合到胡萝卜植株基因组中。2转基因植株的RT-PCR分析显示部分植株进行了反转录。3对转录水平上有表达的转基因植株进行Western Blot和ELISA分析,结果表明转基因胡萝卜植株可以有效地表达VP7蛋白,并具有一定的免疫原性。4利用转VP7基因胡萝卜根部蛋白注射免疫小鼠,抗原免疫量为1μg左右,免疫周期为两周,免疫三次后采血并提取小鼠血清进行ELISA分析,结果表明注射阳性胡萝卜植株蛋白的小鼠体内IgG含量要高于注射阴性胡萝卜植株蛋白的小鼠及未免疫的小鼠。利用转VP7-U基因胡萝卜根部蛋白灌胃免疫小鼠,抗原量为20-30μg,免疫周期为一周,免疫四次后采血提取血清并进行ELISA检测,结果表明灌服VP7-U基因的胡萝卜植株蛋白的小鼠IgG含量要高于灌服阴性植株的小鼠或未灌服小鼠的IgG的含量。5同时将转VP7-U基因的植株抗原量与VP7基因植株抗原量进行比较,ELISA分析表明,转VP7-U基因的植株抗原量要高于VP7基因植株抗原量。
其他文献
立体绿化植物可通过对壁面、坡面、篱垣、护栏、立柱、屋顶、棚架等的绿化,增加绿化面积,缓解当前城市用地紧张的矛盾,在城市园林建设和生态环境建设中发挥着日益重要的作用。我
本研究以临安典型天然次生灌丛为例,通过样地调查资料,运用地统计学和GIS空间分析方法,对研究区小尺度次生灌丛植被的空间变异特征进行了研究,并基于冗余分析排序和偏冗余分
本试验自行开发出的低能耗、光强分布均匀一致、高空间利用率的侧向节能照光系统。并将其与冷阴极荧光灯(CCFL)照光系统、发光二极管(LED)照光系统应用于文心兰组织培养中进