射精是雄性性行为时将精液射出的反射性动作,是维持人类以及其他哺乳动物性和谐、生命得以延续的最基本的生命现象。就人类而言,射精被认为是生物界最神奇的生命现象。早泄和射精迟缓症等射精功能障碍,不仅影响生育,还影响性生活质量。因此,针对动物射精过程中脑神经调控分子机理的研究,不仅能为认识动物射精的生理规律开辟新的思路,而且将为临床研究提供新的科学依据。本论文通过雄性大鼠射精过程中脑神经转录组的测序,寻找并挖掘与射精相关的基因,为探索大鼠射精过程中脑神经调节的分子机理提供科学依据。其主要研究结果如下:1.建立了一个方法简单、方便,适合并能保证本课题相关研究可行的雄鼠交配实验模型。2.开展了不同剂量的8-OH-DPAT和达泊西汀对雄鼠射精的影响的研究,结果表明,0.5mg/kg8-OH-DPAT能促进雄鼠射精;60mg/kg达泊西汀则显示延缓雄鼠射精的现象。因此,我们选择两个实验剂量开展下面的转录组研究。3.应用Solexa高通量测序技术对雄鼠射精过程进行转录组测序(6个转录组:对照组CK,插入第四次组CR4、射精组EJ,8-OH-DAT给药射精组DPAT,达泊西汀给药组DAP和射精后1min组PEI1),通过转录组之间相互比对以及差异基因统计,主要结果表明,在CR4/CK有42个基因上调,97个基因下调;EJ/CK中有66个基因上调,191个基因下调;DPAT/CK中,有91个基因上调,258个基因下调;DAP/CK中有52个基因上调,155个基因下调;PEI1/CK中,有39个基因上调,91个基因下调;EJ/CR4中,有112个基因上调,191个基因下调;PEI1/EJ中,有128个基因上调,194个基因下调;DPAT/EJ中,有264个基因上调,487个基因下调;DAP/EJ中,有162个基因上调,211个基因下调。4.通过对其差异基因的表达水平变化规律进行分析,我们推测Drd4、Tph1、Chrna3、Chrnb4、Oxt、Prl、Avp、Pomc、Gabra6、Gabrr1 和 Cacna1f共 11 个基因可能参与射精调节的生物行为。另外,Drd1和Slc6a3可能涉及8-OH-DPAT促进射精的分子机制,而Drd4涉及达泊西汀延缓射精的分子机制。5.利用qRT-PCR技术对这11个基因进行检测验证,结果表明:11个基因的相对表达量的表达变化趋势与转录组里的基本一致。这表明本实验的转录组数据是可靠准确的。6.综合分析本实验获得的大量雄鼠射精关联基因瞬时表达信息,我们假设:"接受外界刺激信号的中枢神经,通过启动包括神经递质受体、离子通道、内腓肽前体和肽类激素等射精调节相关基因的表达,并通过翻译相关功能蛋白或酶,直接或间接地、正反馈或者负反馈式地作用于中枢神经,形成脑神经调节回路并完成射对精过程的调节"。7.我们通过生物信息学对11个射精相关基因进行同源性分析,发现Tph1、Chrna3、Oxt、Gabra6、Gabrr1 和 Cacnalf 较为保守,而 Drd4、Chrnb4、prl、Avp 和 Pomc 保守较低。通过平均同源性分析,他们在人类中可能进化速度较快。本论文首次利用Solexa高通量测序技术对大鼠射精模型进行了转录组研究,获得了大量雄鼠射精相关的基因信息,筛选并通过qRT-PCR技术对其中11个相关基因进行证实,这为射精分子机制的研究打下了坚实基础。