论文部分内容阅读
目的：本试验通过检测抑癌基因P16甲基化程度及血管内皮生长因子(VEGF-C)在舌鳞癌组织中的表达,研究舌癌淋巴转移机制中两者的相关性及作用,为舌癌易感人群的早期诊断及降低淋巴结转移率提高预后提供理论依据。方法：运用甲基化特异性聚合酶链反应技术及免疫组化技术,分别检测30例淋巴结转移舌癌组织(实验组)和30例无淋巴结转移舌癌组织(对照组),研究抑癌基因P16启动子区域的甲基化程度及P16蛋白与VEGF-C的表达情况,并结合临床病理资料(性别、年龄、肿瘤侵犯部位、组织病理分化程度、有无淋巴结转移等因素)进行分析,旨在探索舌癌淋巴转移的过程中抑癌基因P16甲基化程度与VEGF-C表达的相关性。结果：荧光甲基化特异聚合酶链反应Q-MSP部分：实验组30例淋巴结转移舌癌组织,通过Q-MSP定性检测,使用甲基化引物序列,检测出合理P16 CPG岛甲基化扩增图形,CP值在20-30之间,甲基化阳性率为76.66%(23/30),对照组为30例未发生淋巴结转移舌癌组织,使用同样甲基化引物序列进行检测,P16甲基化阳性率为36.66%(11/30),实验组及对照组两者数据比较差异明显,具有统计学意义(P<0.05)；同时使用非甲基化引物序列参与,实验组30例舌癌组织获得扩增图形63.33%(19/30),对照组获得合理扩增图形为26.66%(8/30),CP值在20-30之间,实验组及对照组两者数据比较差异明显,具有统计学意义(P<0.05)。免疫组化实验部分：实验组中P16甲基化阳性率为76.66%(23/30),P16蛋白表达率为20%(6/30)；对照组中P16甲基化阳性率为36.66%(11/30),P16蛋白表达率56.66%(17/30),二者之间差异明显,具有统计学意义(P<0.05)。通过phi相关系数计算P16甲基化和P16蛋白表达之间的关系,得出结果r=0.7841,说明P16基因甲基化与P16蛋白具有强相关性；实验组中VEGF-C阳性表达率为70%(21/30),在30例淋巴结转移舌癌中VEGF-C阳性表达为(-)4例、(+)11例、(++)15例；对照组中VEGF-C阳性表达率为23.33%(7/30),在30例无淋巴转移舌癌组织中VEGF-C阳性表达为(-)23例、(+)3例、(++)4例,明显低于实验组,因此VEGF-C阳性表达率在舌癌淋巴结转移组织和无淋巴结转移组织之间差异性具有统计学意义(P<0.05)。不同性别、年龄及肿瘤侵犯部位的舌癌组织中p16基因甲基化表达程度没有统计学意义(P>0.05),不同组织学分化程度、有无淋巴转移的舌癌组织中p16基因甲基化表达程度具有统计学意义(P<0.05)；不同性别、年龄、肿瘤侵犯部位及分化程度的舌癌组织中VEGF-C的表达率没有统计学意义(P>0.05),有无淋巴结转移的舌癌组织中VEGF-C的表达率具有统计学意义(P<0.05)。实验组中P16蛋白表达率为20.00%(6/30),VEGF-C阳性表达率为70.00%(21/30),通过统计学phi相关系数计算实验组舌癌淋巴结转移组织中P16基因蛋白表达和VEGF-C的表达相关性,得出结果r=0.5749,而P16基因甲基化与P16蛋白失活存在强相关性,间接证实P16基因甲基化和VEGF-C在舌癌淋巴结转移机制中具有中度相关性。结论：1、P16甲基化及VEGF-C的表达与患者性别、年龄、肿瘤侵犯部位等临床病理因素无明显相关性,与癌组织分化程度、是否有无淋巴结转移等因素密切相关；2、P16甲基化程度与P16蛋白表达具有强相关性,P16甲基化是导致肿瘤发生和发展的重要诱导因素,参与肿瘤发展过程中的各个阶段；3、VEGF-C在淋巴结转移舌癌组织中的表达率明显高于无淋巴结转移组织,VEGF-C的高表达可能是导致舌癌早期淋巴结转移的重要因素；4、P16甲基化与VEGF-C的表达在舌癌淋巴转移机制中具有明显相关性,P16甲基化可作为检测及早期诊断舌癌易感人群的重要判断依据,VEGF-C可以作为临床判断舌癌的侵袭性、转移潜能及估计预后的重要参考指标；