下肢静脉高压大鼠后肢皮肤病变的组织学研究

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研究目的:通过建立合适的下肢静脉高压大鼠动物模型,予以舒洛地特腹腔注射对比观察大鼠后肢病变组织的组织学改变,并探索舒洛地特对下肢静脉高压血管修复效果。研究方法:将SD大鼠随机分为4组,第1组:下肢静脉高压+舒洛地特组;第2组:下肢静脉高压+生理盐水组;第3组:单纯下肢静脉高压组;第4组:空白对照组。第1、2、3组大鼠结扎股静脉制造静脉高压模型。第1组予以腹腔注射舒洛地特2mg/(kg*d),连续2周;第2组予以腹腔注射生理盐水2mg/(kg*d),连续2周;第3、4组不做处理。造模成功后观察大鼠活动、饮食、切口及后肢皮肤变化。于第1周、第2周、2月分别采集大鼠后肢远端组织,每组每个时点各处死3只大鼠,各组死亡大鼠按时补齐。采集的组织标本进行HE切片染色、免疫组化染色和免疫荧光检测。分别检测下肢静脉高压大鼠后肢组织炎症反应情况以及VCAM-1、ICAM-1、TNF-α、TGF-β、eNOS和Syndecan-1的表达水平。研究结果:1、所有SD大鼠静脉高压动物模型造模成功率为97.2%;2、大鼠造模成功后饮食、活动正常、切口未见明显感染迹象;3、HE染色结果显示:第1组组织标本炎细胞浸润程度随着时间延长逐渐减轻,而2、3组随着时间延长炎细胞浸润越严重,表明舒洛地特可以改善下肢静脉高压时大鼠后肢远端组织的炎症;4、免疫组化结果显示:1周、2周、2月时第2组和第3组VCAM-1、ICAM-1、TNF-α和TGF-β阳性表达量逐渐增加,eNOS阳性表达量逐渐减低;第1组VCAM-1、ICAM-1、TNF-α和TGF-β阳性表达量逐渐降低,eNOS阳性表达量逐渐增加;第4组无明显变化。这一结果表明静脉高压时血管内皮细胞存在损伤,而舒洛地特可以降低VCAM-1、ICAM-1、TNF-α和TGF-β的表达水平,增加eNOS表达水平,说明舒洛地特可以有效的修复下肢静脉高压时的血管内皮;5、免疫荧光结果显示2个月时第1组组织中Syndecan-1含量明显较第2组高,进一步说明下肢静脉高压时的血管内皮存在损伤,并且舒洛地特可以有效的修复内皮损伤。结论下肢静脉高压大鼠后肢远端组织中存在明显炎症反应和血管内皮损伤,VCAM-1、ICAM-1、TNF-α、TGF-β表达水平增加,eNOS表达水平降低;舒洛地特可以改善组织中的炎症反应并且有效的修复下肢静脉高压时损伤的血管内皮,调节VCAM-1、ICAM-1、TNF-α、TGF-β、eNOS和Syndecan-1的表达。
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