螺旋藻多糖硫酸酯的制备及其抗肿瘤和免疫活性的初步研究

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本论文主要对螺旋藻多糖(Polysaccharide from Spirulina platensis,PSP)及其修饰后产物螺旋藻多糖硫酸酯(Sulfated Polysaccharide from Spirulina platensis,SPSP)的性质结构、抗肿瘤及免疫活性进行研究。 PSP是从海洋生物螺旋藻(Spirulina plantensis)中提取分离的均一葡聚糖,经高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)检测分子量约410KD,苯酚-硫酸法检测糖含量为94.18%,紫外和红外扫描均无硫酸基团的特征吸收。应用氯磺酸-吡啶法对PSP进行硫酸酯化修饰,修饰后的产物SPSP红外和紫外图谱均显示有硫酸基团的特征吸收峰,氯化钡-明胶法测定其硫酸根含量为21.22%。 本文应用MTT法和细胞形态观察法考察了PSP和SPSP体外对多种肿瘤细胞的细胞毒作用,运用小鼠移植性肿瘤模型观察了PSP和SPSP体内对小鼠肿瘤的抑制作用。结果表明:PSP在12.5~200μg/mL的浓度范围内对Hela和SMMC-7721无细胞毒作用,100~200μg/mL的浓度对KB,SGC-7901和K562有一定的细胞毒作用,但抑制率均小于15%;SPSP在12.5~200μg/mL的浓度范围内对KB,Hela,SGC-7901,SMMC-7721,K562均有明显的细胞毒作用,其中对KB,SGC-7901和SMMC-7721三种细胞的抑制作用较强,抑制率在15~37%之间。PSP 50~100μg/mL的浓度对KB和SGC-7901细胞形态影响不大,25~100μg/mL浓度的SPSP对KB和SGC-7901细胞形态具有较明显的影响。不同剂量的PSP对小鼠S180肉瘤和Heps肝癌有一定的抑制作用,但与模型组比较无显著性差异;SPSP 50mg/kg对小鼠S180肉瘤具有显著的抑制作用,抑瘤率为32.7%,100mg/kg对小鼠Heps肝癌具有显著的抑制作用,抑瘤率为35.5%。PSP和SPSP对小鼠EAC腹水癌均无显著抑制作用。 本文通过观察PSP和SPSP对正常小鼠脾淋巴细胞增殖和IL-2生成的影响、对正常小鼠碳粒廓清速率和血清溶血素水平、对荷瘤小鼠NK和CTL细胞杀伤活性的影响来研究它们对机体免疫功能的作用。结果显示,PSP能促进正常小鼠的脾淋巴细胞增殖和IL-2的生成,对荷瘤小鼠的NK细胞活性具有增强作用;SPSP能单独并协同ConA或LPS促进正常小鼠脾淋巴细胞增殖,促进正常小鼠脾淋巴细胞生成IL-2,提高正常小鼠的碳粒廓清速率和血清溶血素水平,并能增强荷瘤小鼠NK和CTL细胞的杀伤活性。
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