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背景和目的：脊髓损伤（spinal cord injury, SCI）在全球每年的总发病率为0.002%-0.004%，每年新增约十余万人，现有约250万患者。脊髓损伤后患者的生活能力低下，给家庭和社会造成沉重的负担，而现今的医疗手段对于患者的功能恢复帮助有限，成年神经干细胞的发现为脊髓损伤后的细胞替代治疗带来了新的曙光。SCI后患者自身内源性的神经干细胞增殖水平低下，且不能形成有效的神经通路，对神经功能的恢复帮助有限，干预空间较大。最近研究证实，组蛋白去乙酰化酶抑制剂（histone deacetylaseinhibitors，HDACIs）能促进缺血、外伤后模型动物的神经功能恢复，具有一定的神经保护作用，具体机制尚不清楚。HDACIs包括丙戊酸、曲古抑菌素A等几种药物，其中，丙戊酸钠(sodium valproate，VPA)能明显抑制体外培养的某些肿瘤干细胞增殖，但对正常的神经干细胞的调控研究甚少。在实验中，首先建立了大鼠脊髓损伤动物模型，并给予VPA干预，通过BBB评分和神经电生理的下肢运动诱发电位（MEP）和肢感觉诱发电位（SEP）来观察其对神经功能恢复的影响，确定其对大鼠脊髓损伤的神经保护作用后，分离和培养出成年大鼠脊髓神经干细胞(neural stem cells，NSCs)，并使用VPA来处理成年雌性大鼠离体脊髓神经干细胞，观察了其对NSCs增殖和分化的影响，并探讨了可能的调控机制。方法：1.建立大鼠脊髓损伤动物模型，按随机数目表法随机分为正常对照组5只（打开椎板，不损伤脊髓）、SCI对照组11只、SCI＋VPA干预组11只，分别于伤后1w、2w、3w、4w、5w、6w、7w、8W分别进行行为学评价和神经电生理检测。2.用组织培养法进行成年大鼠脊髓神经干细胞的培养，免疫荧光技术鉴定NSCs。3.增殖培养基（DMEM/F12、B27、EGF、bFGF）培养条件下，用VPA处理离体NSCs，药物作用浓度为：10-6mmol.L-1、10-5mmol.L-1、10-4mmol.L-1、10-3mmol.L-1、10-2mmol.L-1、10-1mmol.L-1、1mmol.L-1及10mmol.L-1，并设有阴性对照，作用时间为24h、48h及72h，然后用CCK-8法检测其对NSCs细胞增殖的影响；用VPA处理离体NSCs，药物作用浓度为：10-5mmol.L-1及1mmol.L-1，并设有阴性对照，作用时间为48h，然后用流式细胞仪测定其对NSCs细胞周期分布的影响，用PCR法测定NSCs的P21基因表达水平，用Western-Blot法测定NSCs的P21蛋白质表达水平。4.普通分化培养基（DMEM/F12、B27）培养条件下，采用不同浓度的VPA(10-5mmol.L-1、10-4mmol.L-1、10-3mmol.L-1、10-2mmol.L-1、10-1mmol.L-1、1mmol.L-1)作用于NSCs，CCK-8法检测在不同时间点(3day、6day、9day、12day、15day)对细胞增殖的影响；VPA(10-5mmol.L-1、1mmol.L-1)作用于NSCs7d及14d后，流式细胞仪检测（Nestin, GFAP, β-tubulin III, Olig2）染色阳性细胞比率。结果：1.相比SCI对照组， VPA干预组的BBB评分更高，神经电生理检测的MEP峰潜伏期更接近假手术组。2.增殖培养基（DMEM/F12、B27、EGF、bFGF）培养条件下，CCK-8检测显示:给予VPA浓度≥10-5mmol.L-1时，将明显抑制离体成年大鼠脊髓NSCs的增殖，同时这种效应具有时间依赖性，即同一给药浓度，作用时间越长，抑制作用越明显。3.增殖培养基（DMEM/F12、B27、EGF、bFGF）培养条件下，细胞周期检测显示:给予VPA浓度≥10-5mmol.L-1时，G0/G1期细胞增多，S期细胞减少，G2/M期细胞减少。4.增殖培养基（DMEM/F12、B27、EGF、bFGF）培养条件下，PCR检测发现VPA可促进P21基因水平的表达。5.增殖培养基（DMEM/F12、B27、EGF、bFGF）培养条件下，Western-Blot检测发现VPA可促进P21蛋白质水平的表达。6.普通培养基（DMEM/F12、B27）培养条件下，CCK-8检测显示:当VPA浓度≥10-5mmol.L-1时，细胞增殖曲线呈波浪现象，表现为先抑制后促进其增殖。7.普通培养基（DMEM/F12、B27）培养条件下，流式细胞仪检测（Nestin, GFAP,β-tubulin III, Olig2）染色显示：VPA作用组7d及14d的nestin阳性细胞明显少于对照组，β-tubulin III及Olig2阳性细胞明显大于对照组。结论：1. VPA干预有助于大鼠脊髓损伤模型动物的神经功能更快恢复。2.在增殖培养基培养条件下，VPA抑制NSCs增殖，这可能是通过促进P21表达，使NSCs阻滞于G0／G1期。3.在分化培养基培养条件下，VPA可以促进NSCs分化并且促进分化后的细胞增殖，尤其是早期神经元细胞和少突胶质细胞居多。