大鼠盲肠结扎穿孔脓毒症模型建模新方案的应用研究

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目的:目前模拟临床脓毒症最佳的动物模型为啮齿类动物的盲肠结扎穿孔(CLP)模型,其主要方法是分别通过控制盲肠穿刺针粗细、穿孔个数和盲肠结扎的长度来控制实验动物的死亡率,但在实际应用过程中其实验结果可重复性较差。本研究旨在建立以标测盲肠体积为基础的CLP模型来进一步控制动物感染严重程度与死亡率,同时模拟以往文献中以标测盲肠长度为基础的CLP模型进行对比,探索提高模型稳定性的可行性方案。方法:采用雄性SD大鼠建立盲肠结扎穿孔模型,分长度标测结扎及体积标测结扎两大组,长度标测组用丝线测量由回盲瓣至盲肠顶端全长,按不同长度比例分亚组结扎盲肠(盲肠全长的50%及75%),体积标测组用亚甲蓝标记盲肠体积,按不同体积分亚组结扎盲肠(0.5ml,1.0ml, 1.5ml, 2.0ml和2.5ml);结扎后均用21号针头单次贯通穿孔盲肠,术后6小时进行血培养及腹腔分泌物涂片培养并观察7天死亡率。结果:长度标测结扎组内50%和75%组7天死亡率分别为90%和100%,两组间无显著差异(n=10, p =0.661)。体积标测结扎组内死亡率随盲肠结扎体积增加而上升,0.5ml,1.0ml,1.5ml,2.0ml和2.5ml各组7天死亡率分别为40%、50%、60%、80%和100%,各组间存在显著差异(n=10, p =0.002),而假手术组全部存活。长度标测结扎组50%和75%亚组平均存活时间分别为1.621±0.605天和1.150±0.099天。体积标测结扎组平均存活时间从0.5ml结扎亚组的4.708±0.893天到2.5ml结扎亚组的1.175±0.240天。CLP术后6小时血培养及腹腔分泌物涂片培养除假手术组外均为阳性。结论:手术操作过程及实验数据显示盲肠体积结扎穿孔法是一项更容易进行的标准化操作,是实验结果重复性更好的CLP造模方法,可推广应用于对脓毒症机制的研究以及对药物疗效进行评估。
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