体细胞胚胎发生技术在植物快繁、种质资源保存、遗传转摘要化、基因工程等领域具有广阔的应用前景和经济价值。已有研究表明,体细胞胚胎发生与氧化胁迫、DNA甲基化状态等有密切关系。迄今,椏柑体细胞胚胎发生的生理与分子机理尚不清楚。基于此,本论文以桠柑胚性愈伤组织为起始材料进行体细胞胚的诱导,分析该过程中其可溶性蛋白含量、三种抗氧化酶活力和活性氧水平的动态变化,以期了解抗氧化系统在体细胞胚胎发生中的作用；利用已公布的甜橙基因组数据,鉴定NADPH氧化酶基因家族成员,分析它们在椏柑体细胞胚诱导过程中的表达情况,以期筛选出与体细胞胚胎发生的特异NADPH氧化酶基因；采用MSAP技术分析桠柑体细胞胚诱导过程中DNA甲基化水平和模式变化,以期初步揭示其表观变化规律。主要研究结果如下：1.选取椏柑体细胞胚诱导过程中四个阶段的培养物：即刚接种的胚性愈伤组织(E10),转成黄色的胚性愈伤组织(E11),肉眼可见的胚状体(E12)和出现50%以上的胚状体(E13),进行可溶性蛋白含量、H202水平及抗氧化酶(POD、CAT、SOD)活力的测定。结果表明：可溶性蛋白含量先下降后逐渐升高；过氧化氢含量先逐渐上升后下降；从E10到E12过程三种酶活力都表现出先升高后下降的变化规律,但在E12到E13过程,POD、CAT活力下降,SOD活力则升高。2.采用生物信息学方法在柑橘基因组数据库中筛选出13个柑橘NADPH氧化酶基因,并分析这些基因在桠柑体细胞胚诱导过程中的表达情况。结果表明,四个阶段共检测到8个基因(CsRboh1、CsRboh2、CsRboh5、CsRboh6、CsRboh7、 CsRboh10、CsRboh11和CsRboh12)的表达,且变化趋势有明显差异：未检出表达的基因是CsRboh3、CsRboh4、CsRboh8、CsRboh9和CsRboh11。其中CsRboh7基因在E12和E13表达。3.采用MSAP技术研究椏柑体细胞胚诱导过程中DNA甲基化水平和模式的变化。结果表明,桠柑体细胞胚发生过程中DNA甲基化整体水平上升,甲基化水平在E11及E13时出现两次高峰,全甲基化为主要的甲基化修饰模式,外侧胞嘧啶半甲基化修饰模式相对较少。