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围产期(产前3周至产后3周)是奶牛内分泌和代谢发生巨变的时期,此时期奶牛经历了不同程度的能量负平衡(NEB),可影响其产后生产性能和对疾病的易感性。改善围产期奶牛的营养管理水平,最大限度地缓解NEB,对于充分发挥奶牛的生产性能至关重要。日粮饲料品质直接影响奶牛的泌乳性能和健康水平,目前有关围产期日粮粗饲料类型和精粗比的研究还较少。本研究通过评价不同粗料来源和精粗比的两种日粮对围产期奶牛内分泌、代谢变化及泌乳功能的影响,旨在为优化围产期奶牛的日粮结构和改善乳品质提供试验依据。本论文的研究内容和试验结果如下:1、12头健康的围产期经产荷斯坦奶牛,随机分为两组,每组6头,分别饲喂两种不同日粮。玉米秸秆组(CS)日粮组成包括33.8%的粗饲料(单一玉米秸秆)加66.2%的精饲料(日粮精粗比约为60:40);混合粗饲料组(MF)日粮组成包括58.6%的混合粗饲料(3.7%羊草、28.4%苜蓿干草和26.5%全株玉米青贮)加41.4%的精饲料(日粮精粗比约为40:60)。预饲期为2周,试验期为产前3周~产后8周。结果发现,两种日粮对围产期奶牛BW、BCS、DMI和泌乳相关内分泌激素(E2、P4、GH、PRL、INS和IGF-I)均无显著影响(P>0.05)。MF组奶牛产后6~8周的产奶量显著高于CS组(P <0.05),且MF组奶乳中乳蛋白(P=0.07)和乳脂肪产量(P=0.10)有高于CS组奶牛的趋势。乳中乳糖产量、乳蛋白率、乳脂率和乳糖率均不受两种日粮影响(P>0.05),但CS组奶牛乳中体细胞评分(SCS)显著高于MF组(P <0.05)。试验期MF组奶牛经历了更严重能量负平衡(NEB),且在产后1~3周,血清β-羟丁酸(BHBA)和非酯化脂肪酸(NEFA)浓度显著高于CS组(P <0.05)。泌乳初期,奶牛乳腺细胞增殖率不受日粮影响(P>0.05),但CS组奶牛乳腺细胞凋亡率显著高于MF组(P <0.05)。奶牛乳腺组织CSN2、CSN3、ACACA和FASN mRNA的相对表达丰度不受日粮影响(P>0.05),但MF组奶牛IGFIR mRNA的相对表达丰度显著高于CS组(P <0.05)。2、应用Real-time PCR方法检测不同浓度(0、1、10和100ng mL-1)IGF-I处理后的体外培养奶牛乳腺上皮细胞乳蛋白和脂肪合成相关基因mRNA的相对表达量。结果发现,添加不同浓度的外源IGF-I对体外培养奶牛乳腺上皮细胞IGFIR、IGFBP3、CSN1S1和CSN3mRNA的相对表达丰度无显著影响(P>0.05)。随着IGF-I添加浓度的增加,CSN2、ACACA、FASN和FABP3mRNA的相对表达丰度显著上调(P <0.05)。3、无激素处理组(NH,对照组)、氢化可的松(50ng mL-1)+催乳素(200ng mL-1)处理组(FP)和胰岛素(100ng mL-1)+氢化可的松(50ng mL-1)+催乳素(200ng mL-1)处理组(IFP)处理体外培养奶牛乳腺上皮细胞24h,利用Real-time PCR方法检测乳腺上皮细胞中乳蛋白和乳脂肪合成相关基因mRNA的相对表达丰度。结果表明,IFP激素处理组显著上调CSN2、CSN3、ACACA、FASN和SREBP1mRNA的相对表达丰度(P <0.05);显著上调JAK2-STAT5信号通路中STAT5B和ELF5mRNA的相对表达丰度(P <0.05);显著上调PI3K/Akt/mTOR信号通路中PI3K、AKT1和EIF4E mRNA的相对表达丰度(P <0.05)。