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目的:检测胃癌细胞、胃癌细胞exosome和胃癌患者血清exosome内lncRNA RMRP(RNA component of mitochondrial RNA processing endoribonuclease)的表达情况,并寻找其潜在的临床诊断价值;探讨exosome内RMRP对胃癌细胞增殖和迁移能力的影响,为胃癌的诊断和治疗提供新的思路和靶点。方法:1.采用透射电镜、Western blot、纳米颗粒跟踪分析仪ZetaView检测血清exosome的形态、粒径、表面标记蛋白C D9、CD63、CD81;采用荧光定量PCR检测健康体检者血清和胃癌患者血清exosome内7SK RNA、IPW、H19、RMRP等lncRNAs的表达水平,筛选差异性表达的lnc RNAs分子;绘制ROC曲线,分析相关lncRNAs的诊断效能。2.采用siRNA-NC(si-NC)和siRN A-RMRP(si-RMRP)片段转染胃癌细胞SGC-7901和HGC-27,荧光定量PCR验证细胞内RMRP敲减的效率,体外采用平板克隆形成实验、transwell迁移实验检测RMRP敲减后细胞生长和迁移的情况,检测PCNA、Bcl-2、干性基因及EMT相关基因的蛋白质和mRNA水平的表达情况。体内采用裸鼠皮下荷瘤实验观察敲减RMRP的胃癌细胞在体内致瘤的能力,Western blot、q RT-PCR、免疫组化等方法检测瘤组织中PCNA、Bcl-2、干性基因及EMT相关基因的表达水平。3.提取转染si-NC和si-RMRP的SGC-7901和HGC-27细胞上清来源exosome,Western blot检测exosome的表面标记蛋白,将si-RMRP-exosome与胃癌细胞共孵育,成像流式细胞仪观察胃癌细胞对exosome内吞现象。体内外实验检测si-RMRP-exosome被摄入后对胃癌细胞增殖和迁移能力的增殖。结果:1.提取健康体检者和胃癌患者血清来源exosome为“杯状”或“碟状”的小囊泡,粒径在100nm左右,表达exosome膜表面标志物CD9、CD63、CD81;q RT-PCR检测结果显示胃癌血清exosome内RMRP表达明显高于健康体检者血清exosome,但7SK RNA、IPW、H19则无显著性差异,并且在胃癌细胞来源exosome内RMRP的表达也较胃粘膜上皮细胞升高;ROC曲线分析发现胃癌血清exosome内RMRP的曲线下面积为0.667,灵敏度为86.1%,特异性为42.5%。2.转染si-RN A片段后胃癌细胞SGC-7901和HGC-27内RMRP表达下调,细胞克隆形成能力和迁移能力均减弱;PCNA、Bcl-2、干性基因(Oct4、Nanog、Lin28)表达下调,EMT进程被抑制;体内试验中,敲减组移植瘤的体积和重量均小于对照组,且胃癌细胞的增殖减弱,EMT进程被抑制。3.胃癌细胞SGC-7901和HGC-27能够内吞si-RMRP-exosome,且发现si-RMRP-exosome处理后胃癌细胞的增殖和迁移能力较对照组明显减弱;体内实验中,与si-NC-exosome组相比,si-RMRP-exosome组的皮下移植瘤的体积和重量均小于对照组,PCNA、Bcl-2、干性基因等表达水平被显著抑制,增殖能力减弱;E-cadherin表达上调、而N-cadherin和Vimentin表达下调。结论:胃癌血清和胃癌细胞exosome内RMRP显著高表达,胃癌血清exosome内RMRP具有较高的诊断灵敏度,是潜在的胃癌诊断新型分子标志物。Exosome能够介导RMRP的传递,促进胃癌的增殖和迁移能力,为胃癌诊断和治疗提供新思路。