背景：弓形虫(Toxoplasma gondii)为专性细胞内寄生原虫，全球分布，能引起人兽共患的弓形虫病，全世界约1／3人口感染，大多数为隐形感染，但对于孕妇和免疫功能抑制或低下者，能造成严重危害，孕妇感染常引起流产、畸胎、死胎等，对于肿瘤患者或AIDS病人等免疫功能受损者，弓形虫是引起死亡的主要病原体之一。同时，弓形虫对畜牧业生产也造成了严重危害。因此，弓形虫病的诊断和疫苗研究成为弓形虫病防治工作的重点。筛选和获得敏感性好、特异度高的抗原是诊断和疫苗研究的基础。SAG1蛋白为弓形虫速殖子期特异性抗原，ROP2蛋白为弓形虫生活史各期均分泌的抗原，具有高度的保守性和免疫原性，已成为弓形虫病诊断和疫苗研究的候选分子。 目的：分别克隆和表达SAGI和 ROPZ基因，筛选诊断抗原；构建SAGI八 复合基因，进行疫苗研究。 方法：1．利用PCR技术从弓形虫基因组中扩增出ROPZ基因，并将其克隆到PGEX个Tl进行表达和鉴定。 2．通过PCR将SAGI基因从弓形虫基因组中调出，并克隆到pGEX－4T－1和pET32a中分别进行表达和鉴定。 3．通过酶切和连接，构建SAGI／ROPZ复合基因，并克隆到pET32a中进行表达和鉴定。 结果：1．克隆了截短形式的ROPZ基因，测序结果显示读码框架正确。ROPZ基因以融合蛋白的形式进行了表达，表达产物以包涵体形式存在，具有一定的免疫反应性。 2．克隆了 SAGI基因，SAGI基因在大肠杆菌中分别以不溶性和可溶性的方式进行了表达，兔疫印迹均显示特异的抗原反应性。 3．构建了SAGI爪 复合基因，并以融合蛋白的形式进行了表达，表达产物有一定的免疫反应性。 结论：1．在国内首次克隆了ROPZ基因，并进行了表达和鉴定。 2．克隆了 SAG基因，并以两种方式进行了表达。 ．4． 3．构建了SAGI八 复合基因，为弓形虫疫苗研究提供了抗原分于。