皮肤缺损是临床上最常见的疾病之一,大面积皮肤缺损会严重影响人体健康,乃至危及生命。在皮肤损伤创面修复的研究中发现:细胞治疗法可加快皮肤损伤的修复的进程,小分子多肽胸腺素β4(Thymosin beta 4,Tβ4)可通过分泌抗炎性因子,促进创面修复。而经冷冻干燥处理后的羊皮脱细胞真皮基质(Acellular Dermal Matrix,ADM),可作为一种良好的细胞支架用于细胞移植。因此为提高创面愈合效率,本实验将人脂肪间充质干细胞(human Adipose-derived Mesenchymal Stem Cells,hADSCs)过表达hTβ4基因与羊ADM进行复合,研究其对创面愈合过程的影响。首先,本研究以病患手术中的废弃脂肪组织作为实验材料,将采用胶原酶消化法获得的细胞,通过干细胞相关鉴定,最终确定其为hADSCs。其次,通过电转染法将含hTβ4基因的质粒载体pEX4-hTβ4转入到hADSCs中,经RT-qPCR和Western Blot检测发现:转染后的细胞,其h Tβ4基因表达显著性提高,蛋白表达量也有所提高。随后,利用酶消化法制备出羊ADM,并通过MTS法检测确定羊ADM对目的细胞无毒性作用。最后,将复合有hADSCs过表达hTβ4基因的ADM以及复合有hADSCs的ADM分别覆盖于裸小鼠全层皮肤损伤创面上。并在7,14,21天提取裸小鼠的创面组织,对创面组织HE染色和新生血管分布进行观察,同时对细胞凋亡基因和创面愈合相关基因和蛋白的表达进行检测。结果显示:随愈合时间增长,参与创面修复相关的基因VEGF和Collagen I的表达量均逐渐降低,基因CK18和Collagen III表达量逐渐升高,同时hADSCs过表达hTβ4基因复合羊ADM可显著性提高创面愈合速率,减少细胞凋亡,促进创面修复相关基因和蛋白的表达。本研究初步探讨了转染人Tβ4基因的hADSCs复合羊ADM对于创面愈合的影响,为后续深入研究创面修复机制提供了一定的依据。