外泌体分离的流—场流微流控器件研制

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外泌体在20世纪80年代被首次发现后,其一直被研究人员认定为是细胞排泄出的废弃物,但随着对于外泌体深入研究后发现,它在机体免疫应答,抗原提呈,细胞迁移,细胞分化,肿瘤侵袭等方面都具有十分深远的意义。为了更好的研究外泌体,将其从混合杂质中分离出来是必不可少的一步,因此对简单,高效,性价比高的外泌体分离技术的迫切需求正在日益增长。本文设计并加工了一套针对于外泌体与其他蛋白质组分分离的流场流微流控分离器件,从该方法的原理入手,对各研究中的重要参数进行推导,使用多物理场耦合的仿真软件进行仿真分析研究,为之后的实物器件制作以及样品组分的分离提供依据和方法。首先,本文对场流分离的基本概念做出了系统的解释,进而推出流场流分离概念中的关键参数。在仿真过程中,为了得到影响流场流分离的因素,采用归一化研究的方法,分别通过改变通道高度,通道长度,通道宽度,组分粒径等参数,对外泌体与牛血清白蛋白这两种组分的分离效果进行对比与研究。在流场流微流控分离器件制作的过程中,采用基于PDMS的微流控芯片标准加工工艺制作了流场流微流控器件。经仿真研究,修正器件模型参数,完成了外泌体组分与牛血清白蛋白组分的分离。归一化研究结果分析中得到器件的长度增大,各组分的分辨率变大,通过时间减小;器件的高度增大,各组分的分辨率变大,但通过时间保持不变;通道的宽度无论怎么改变,对于各组分的分辨率与通过时间均无较大影响。通过修改组分粒径的大小,各组分间的分辨率非线性减小。本设计的实物器件通过自行加工的方法制作,对其气密性进行了严格的分析,改善了通道流体外溢的情况,使得通道中的流体仅存在于通道中,满足器件密封性的要求。后续研究中将生物样品组分加入分离通道,选择合理的参数进行分离操作,并将其输出结果进行分析,这将对今后外泌体的研究提供帮助。
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