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萝卜杂种优势明显,自交不亲和是萝卜杂交优势利用的一种重要途径。本研究结合亲和指数法与荧光显微观察法对高代自交材料进行自交不亲和测定。利用SLG和SRK的特异引物,通过限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)研究萝卜的SLG和SRK基因,并对材料的SLG和SRK基因进行克隆验证。为萝卜自交不亲和性杂优利用、了解SLG和SRK基因在十字花科中的进化、萝卜自交不亲和性机理的研究奠定基础。1以萝卜高代自交系为试材,利用荧光显微镜观察其花期和蕾期自花授粉不同时期柱头与花柱,结果发现自交不亲和与自交亲和材料花粉萌发和花粉管伸长状况存在明显差异。自交不亲和材料花期授粉后柱头上出现严重的胼胝质反应,花粉很少萌发,即使萌发也不能正常生长,出现弯曲或背向生长,花粉管顶端膨大不能穿越柱头乳突细胞;自交亲和系萝卜单株花期、蕾期以及自交不亲和系单株蕾期授粉后花粉多数能够正常萌发并穿越柱头进入子房。对供试材料进行了田间自交亲和指数测定,与荧光显微镜测定法鉴定结果高度一致。因此利用荧光显微镜观察法可以准确快速鉴定萝卜的自交不亲和性,从而提高优良自交不亲和系选育效率。2萝卜S位点糖蛋白基因(SLG)和S位点受体激酶(SRK)基因参与了花粉和柱头之间的自交不亲和反应。设计SLG和SRK特异引物,利用PCR-RFLP技术对SLG和SRK基因的多态性进行分析。根据classⅠSLG特异引物扩增产物限制性内切酶酶切后DNA多态性,19个自交系被分为12个S单元型;SRK特异引物扩增酶切后,20个自交系也分为13个S单元型。classⅡSLG特异引物扩增产物限制性内切酶酶切后,根据DNA多态性17个自交系被分为6个S单元型。因此PCR-RFLP技术在区分萝卜S单元型中有着重要作用。对5个SLG等位基因和6个SRK等位基因的DNA序列进行了验证,研究发现氨基酸序列与甘蓝SLG6基因的相似性达80.72%~84.26%,SRK基因与甘蓝中SRK3基因也具有很高的相似性。分析萝卜和甘蓝的SLG序列发现,萝卜的SLG基因并不自己独立成一组,而是分散在树形图中,说明SLG单元型分化在萝卜属和芸薹属分类之前。