目的：角膜是眼球的第一道屏障，对维持视觉具有极其重要的作用。角膜上皮细胞的稳态对于维持眼表完整和视觉功能具有极其重要的作用，角膜上皮受损会影响人的正常生活，尤其当角膜缘受损严重时，角膜上皮无法再生修复，因此需要选择合适而有效的方法重建角膜上皮层。目前常用组织工程的方法构建角膜上皮层，然而组织工程角膜载体支架材料的应用受到柔韧性、降解速率、免疫排斥反应等的限制，因此选择一种安全无毒性、柔韧性好、降解速率合适、免疫排斥反应低且易获取的材料成为目前组织工程角膜支架材料研究的热点。甲壳素具有抑菌性、能促进细胞新陈代谢，并能提高机体免疫力等功效，而且无毒副作用，无免疫原性，在生物医用材料方面有很多应用。方法：本研究以甲壳素为主要材料，主要进行了以下实验研究：1、甲壳素性质、甲壳素混合膜制备及理化性质测定：对甲壳素分子量、脱乙酰度以及红外结构表征等理化性质进行测定；将甲壳素与硫酸软骨素按一定比例制备甲壳素混合膜，并对其厚度、含水量、透光率、机械性能等理化性质进行测定；2、甲壳素混合膜生物相容性：将甲壳素混合曲率膜片贴附于新西兰大白兔眼表，通过对其眼部的定时观察来了解共混膜对兔眼的刺激反应；通过MTT法评价甲壳素混合膜的细胞毒性，并用扫描电镜观察细胞在混合膜上的生长贴附情况；将混合膜植入大鼠皮下和腿部肌肉观察其体内降解情况和组织相容性。3、载细胞混合膜对角膜上皮损伤的修复作用：将载细胞甲壳素混合曲率膜移植到受损的兔角膜上皮层表面，定时进行荧光染色观察其修复情况，并对修复后的角膜上皮层进行病理学和扫描电镜观察。结果：1、本文主要研究材料为脱乙酰度相对较低的大分子量甲壳素，其脱乙酰度为19.33%，分子量为2×10~6KD，并确定了甲壳素混合平面膜和曲率膜的制备方法。制备的甲壳素混合膜厚度在0.2mm左右；在400-800nm之间的透光率均大于80%；含水量为81.59%，与人角膜基质含水量接近；干态下拉伸强度达到14.925MPa，湿态下拉伸强度为3.28MPa，与人眼角膜湿态抗张强度(4MPa)较为接近。2、甲壳素混合膜对兔眼无刺激反应，无细胞毒性，细胞相容性好，并能促进角膜上皮细胞在混合膜上的增殖生长。体内降解时间相对较慢，皮下为22w，肌肉处为18w，组织相容性好，炎症反应小，说明该材料具有良好的生物相容性。3、与对照组相比载细胞甲壳素混合膜能加速角膜上皮细胞的损伤修复速率，且修复后的角膜上皮层结构致密整齐。结论：以甲壳素和硫酸软骨素为材料制备的组织工程角膜载体支架材料基本符合组织工程角膜材料的要求，为组织工程角膜载体支架材料的研究奠定了重要基础。