2型糖尿病是一种多方面的疾病,主要特征是对外周组织葡萄糖的吸收降低,增加肝脏葡萄糖产生,减少胰岛素分泌,使胰岛素敏感性降低。胰岛素抵抗是2型糖尿病的重要特征,其本质是胰岛素信号转导发生障碍。氧化应激被认为是糖尿病发生发展的关键发病因素,增加ROS的水平,会导致胰岛素抵抗。肿瘤坏死因子(TNF-α)是导致胰岛素抵抗的主要炎症因子,它可以减弱胰岛素信号转导,或者诱导氧化应激激活下游的应激敏感信号通路。最近研究发现,Ebselen具有与GPx相似的酶活性,尤其是在抗炎和抗氧化方面效果显著。进一步研究发现Ebselen对Zucker糖尿病大鼠具有降血糖作用。但是Ebselen与胰岛素抵抗及糖尿病的发生发展的联系,还不是很清楚,需要进一步的探究。本文以HepG2细胞为研究对象,用TNF-α刺激细胞,建立胰岛素抵抗细胞模型,研究了Ebselen对TNF-α诱导HepG2细胞胰岛素抵抗的调控作用及其机制。重点探讨了Ebselen对HepG2细胞中糖原合成和糖异生作用,以及对信号转导通路相关分子的磷酸化水平的影响。主要的研究结果如下:我们采用MTT方法、活性氧试剂盒、实时荧光定量PCR技术、蛋白质印迹技术、糖原试剂盒、分光光度法等方法,研究了Ebselen对TNF-α诱导胰岛素抵抗的作用机制。实验结果显示,在TNF-α诱导的胰岛素抵抗状态下,Ebselen干预细胞后,糖原含量明显上升,糖异生基因表达显著降低。表明Ebselen逆转了胰岛素抵抗条件下的葡萄糖代谢的紊乱,能够改善胰岛素抵抗。同时,Ebselen也抑制过多ROS的产生,并抑制JNK、IKKβ、p38 MAPK的磷酸化水平的增加,降低IRS-1的丝氨酸磷酸化水平,增加其酪氨酸磷酸化,上调IRS-1的表达,Akt、GSK-3β和FOXO1的磷酸化水平也都明显增加。表明Ebselen改善胰岛素抵抗的机制很可能是抑制了IKKβ、p38 MAPK和JNK介导的信号通路。