不同剂量含碘中药复方治疗实验性自身免疫性甲状腺炎的疗效机制研究

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目的:观察不剂量含碘中药复方对于实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)大鼠血清中的甲状腺球蛋白抗体(TgAb)、甲状腺过氧化酶抗体(TpoAb)、白介素-1、4、6及TNF-α以及甲状腺组织的超微结构,甲状腺组织病理形态学,甲状腺细胞凋亡相关调控蛋白Fas/FasL、Bcl-2/Bax的影响,进而筛选出治疗AIT的最佳含碘中药复方剂量,并从多靶点探讨其作用机制。材料与方法:选取普通级SD雌性大鼠75只,随后一周进行适应性喂养,然后随机选取15只做为正常对照组,剩余的做为造模组。第二周对照组饮用蒸馏水,造模组饮用的高碘水,浓度为500g/L。第四周起造模组进行初次免疫,应用由完全弗氏佐剂(CFA)和TG(TG:CFA=1:1)进行充分乳化成油包水状,在双后足皮下进行多点注射两次,间隔两天后再进行一次,每次每只大鼠注射100μg。于第五周在后背皮下予以多点注射经不完全弗氏佐剂(IFA)乳化的TG(TG:IFA=1:1),每次每只注射100μg,并连续进行四周,作为加强免疫。第八周成模。将成模的大鼠随机分为模型对照组(13只)、中药治疗低剂量组(14只),中药治疗中剂量组(14只),中药治疗高剂量组(14只)。分组后进行中药复方灌胃治疗6周后,处死大鼠,经腹主动脉取血并采用以下方法进行检测:(1)酶联免疫法(ELISA法):用来检测各组大鼠的血清中的TgAb、TpoAb、TNF-α、IL-1、4、6的变化(2)免疫组化法:用来检测各组大鼠的甲状腺组织中的细胞凋亡相关调控蛋白Fas/FasL和Bcl-2/Bax的变化;(3)取出大鼠的双侧甲状腺,应用电子秤进行称量,观察得出各组的重量并进行统计学分析。(4)光镜下观察各组大鼠的甲状腺组织病理形态学的变化;(5)电镜下观察各组大鼠的甲状腺组织超微结构改变(6)采用SPSS13·0统计软件,并满足方差齐性和正态性,采用方差分析进行组间的比较,各组数据采用x±s进行表示,并对各组的检测结果进行统计学分析。结果:中药高、中、低剂量组与模型组比较:中药各治疗组大鼠的血清中的甲状腺自身抗体TgAb、TpoAb以及IL-1、4、6、TNF-α的水平均有明显的降低,甲状腺组织的Fas/FasL、Bax的表达均减少,甲状腺组织的Bcl-2的表达增多,大鼠的甲状腺重量明显减轻。光镜下观察中药治疗组的甲状腺组织结构的损伤轻于模型组。电镜下观察甲状腺组织的超微结构改变中药治疗组轻于模型组。以上数据中,中药高,中剂量组的作用均优于低剂量组,且高,中剂量组之间无明显差异。结论1.不同剂量的软坚消瘿汤具有降低EAT大鼠的血清中的甲状腺自身抗体水平及相关细胞因子水平的作用。2.不同剂量的软坚消瘿汤具有减轻EAT大鼠甲状腺超微病理损伤的作用。3.不同剂量的软坚消瘿汤具有减轻EAT大鼠甲状腺病理损伤的作用。4.不同剂量的软坚消瘿汤具有减轻EAT大鼠甲状腺细胞凋亡的作用。在以上实验结果中,中药中,高剂量组作用均优于低剂量组,高,中剂量组之间无明显差异。
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