【摘 要】
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研究目的:目前肿瘤基因治疗中,最常用的载体是逆转录病毒载体,研究最多的基因是单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV1-tk)基因.以单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(HSV1-tk)联合抗病毒药物更昔
【出 处】
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中山医科大学 中山大学中山医学院 中山大学
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研究目的:目前肿瘤基因治疗中,最常用的载体是逆转录病毒载体,研究最多的基因是单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV1-tk)基因.以单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(HSV1-tk)联合抗病毒药物更昔洛韦治疗癌症的方案受到广泛支持,许多国内外学者以此方案对多种癌症治疗进行试验探索,该方案用于肿瘤基因治疗已被美国国立卫生研究院(NIH)批准进入临床实验.本着参与、丰富、分享该基因治疗计划的目的,结合中国癌症治疗的实际情况,该课题选择单纯决疹病毒胸苷激酶基因的编码区序列,定向克隆至逆转灵病毒载体pLXSN的多克隆位点,构建重组逆转灵病毒载体,并通过PA317细胞包装后,制成能感染哺乳动物细胞的复制缺陷型病毒.为临床肿瘤患者的基因治疗打下了重要的基础.小结:①采用定向克隆的方法成功地构建了携带单纯疱疹病毒胸苷激酶基因的逆转灵病毒载体,符合表达框架.②用脂质体转染法将重组质粒转染至包装细胞PA317,成功地包装出整合有目的的基因的复制缺陷型病毒.③分别对转染胸苷激酶基因的人肺腺癌细胞和多型性胶质母细胞瘤细胞进行更昔洛韦(GCV)的敏感性试验,证实转染胸苷激酶基因后肿瘤细胞对GCV敏感性提高约700倍,通过动物实验及安全性评价后,我们所获得的携带TK基因的复制缺陷病毒可能用于临床恶性肿瘤的基因治疗试验研究.
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