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目前已有大量的研究表明,人类白细胞抗原(HLA)基因与多种药物不良反应有密切的相关性。其中,针对HLA-B*58:01和HLA-B*15:02等位基因,在服用别嘌呤醇药物后出现的严重不良反应患者中,100%东南亚地区的患者中存在HLA-B*58:01等位基因；而在服用卡马西平药物后出现严重不良反应的患者中,至少75%的东南亚地区的患者中存在HLA-B*15:02等位基因；此外,在未出现不良反应的患者中(耐受人群)和正常对照组中,其携带率大约为15%和20%：在使用这两种药物后,携带HLA-B*58:01和HLA-B*15:02的个体较未携带这两种等位基因的个体出现严重毒副作用的机率显著增加。因此,在服用别嘌呤醇和卡马西平药物之前,国际权威的一些相关治疗指南大都推荐进行HLA-B*58:01和HLA-B*15:02等位基因的检测,以判断是否属于高危人群,以有效降低由该药物引起的严重不良反应。因此,为了满足临床及科研中检测HLA-B*58:01和HLA-B*15:02等位基因的迫切需求,建立一种稳定性好、灵敏度高、操作简便且高通量的检测方法至关重要。目前,已有多种检测HLA-B等位基因的检测方法,但其中多数方法易污染、操作繁琐或者成本很高,难以商品化或者普遍应用于临床。本研究建立并优化了一种基于等位基因特异性聚合酶链式反应(AS-PCR)和多重实时PCR技术检测HLA-B*58:01和HLA-B*15:02等位基因的方法。该方法操作简便、结果容易判读,且重复性好,还可以达到较高的灵敏度和通量,适宜在临床检测及科研中应用。基于本研究建立的检测方法,我们检测了4个民族(汉族、布依族、藏族、维族)的全血基因组DNA样本350例,并使用传统的PCR-SSP和HLA等位基因分型检测的“金标准‘’PCR-SBT方法对其中100例样本进行验证。本研究所建立的检测方法得到的结果与另外两种方法所得到的检测结果完全一致,且HLA-B*58:01和HLA-B*15:02在布依族人群中的分布频率显著高于其他三个民族(17%和16%)。另外,目前只有一篇文献报道,在日本人群中,PSORS1C1基因的一个SNP位点rs9263726与HLA-B*58:01等位基因完全连锁；因而,在本研究中,我们利用等位基因特异性PCR(AS-PCR)和Sanger测序进一步证明了rs9263726在中国人群中与HLA-B*58:01等位基因不存在连锁关系。由此可以看出,由于核苷酸多态性的分布频率在不同地区的多态性,SNP位点与HLA等位基因的连锁关系还需针对不同人群、不同地区来进行有针对性的研究。