microRNA-491在胃癌中的表达和临床意义

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目的胃癌是常见的恶性肿瘤之一,发病率和死亡率均较高,目前治疗效果仍不理想。在分子水平上探讨胃癌的发病机制有助于提供胃癌的早期发现和治疗的新途径,也有助于探寻胃癌的预后因素,从而改善胃癌的治疗效果。microRNA(miRNA)是近年来得以发现的一类广泛存在于动植物体内的非编码小RNA,在转录后水平负性调控基因的表达。据预测,每个miRNA可以调控大约200个基因的表达,存在于人体内的大约1000个miRNAs可调控超过1/3的蛋白编码基因的表达,影响着几乎所有的信号通路。miRNA已被证实广泛参与多种生理病理过程,包括肿瘤的发生和发展。现已发现若干microRNAs直接参与胃癌的发生和发展,nicroRNAs表达谱与胃癌的分期、进展和预后等密切相关。本实验研究胃癌和癌旁正常组织中miR-491的表达水平和胃癌发生和发展的联系,为胃癌预防、临床诊断和治疗开辟一条新的道路。方法利用real time PCR检测40例胃癌组织及相应癌旁正常组织中miR-491的表达水平。通过细胞转染将miR-491成熟体和反义链转入BGC823细胞,通过MTT,流式细胞仪,transwell小室等试验,检测其生物学行为的改变。并利用MTT,流式细胞仪和AO/EB染色法来观察其在氟尿嘧啶的作用下生长抑制和凋亡的改变。采用SPSS13.0统计分析软件进行统计学处理,根据不同的数据类型选择不同的统计方法:计量资料用均数±标准差(Mean±SD)表示,采用独立样本t检验或曼-惠特尼U检验分析实验组和对照组间的关系。准α=0.05,P<0.05为有显著差异。结果胃癌组织中miR-491的表达明显高于相应癌旁正常组织,并且胃癌恶性程度与癌旁正常组织中miR-491表达量成反比,统计学数据显示p<0.05。通过MTT,流式细胞仪,transwell小室等试验数据显示,转入miR-491前体的BGC823细胞,生长速度显著降低,在s期细胞周期分布减少,迁徙和侵袭能力无明显变化,5f作用后细胞凋亡比例明显高于对照组。转入miR-491反义链的BGC823细胞则出现上述相反的现象。结论明确胃癌组织中miR-491明显低于癌旁正常组织中miR-491的表达,并且胃癌恶性程度与胃癌癌周组织中miR-491表达量成负相关。miR-491在胃癌细胞中起到抑制细胞生长,阻止细胞分裂。miR-491可以影响胃癌细胞对化疗药物的敏感度,在胃癌细胞中的高表达可以显著提高氟尿嘧啶对胃癌细胞的抑制和杀伤作用。miR-491在癌组织中的低表达对胃癌的诊断提供一定的帮助,还可能对胃癌的进一步防治提供新的思路。
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