多肽硫酯是蛋白质化学合成中用到的一种关键合成中间体。在使用基于9-芴甲氧羰基的固相多肽合成方法进行多肽硫酯制备时,由于亲核性脱保护条件的使用,多肽硫酯的直接合成比较困难,因此常采用先合成硫酯前体再进行活化的策略。多肽邻苯二胺是一种在前人研究中已被使用的多肽硫酯前体,具有容易制备等优点。然而,前人所使用的多肽邻苯二胺活化方法选择性较差,活化步骤在全保护状态下进行。若多肽邻苯二胺的活化能在无保护状态下进行,该硫酯前体在多片段连接中的应用有望得到进一步拓展。本文报道了一种选择性活化多肽邻苯二胺的方法。完全无保护的多肽邻苯二胺可在酸性水溶液中被亚硝酸钠活化,进而在外加硫醇作用下转变为多肽硫酯,用于蛋白质化学合成。一系列模型实验表明,该方法对多种碳末端氨基酸残基具有较高的效率,消旋倾向较低,且保持了自然化学连接的选择性。中间体捕获实验表明活化过程经历了多肽苯并三氮唑这一活性中间体。由于亚硝酸钠活化条件与多肽所含的各种官能团兼容,多肽邻苯二胺可作为活性被掩蔽的硫酯参与连接反应,并在需要时得到活化。该特性使得其在蛋白质多片段连接中的应用得到了拓展。本文以组蛋白H2B的全合成为例展示了多肽邻苯二胺亚硝酸钠活化法在多片段连接中的实用性。组蛋白H2B被分为五个多肽片段,以收敛式策略合成。多肽邻苯二胺在合成中发挥了活性被掩蔽的硫酯的作用,并且展现了与基于自由基的选择性脱硫等蛋白合成中常用反应的兼容性。最后,本文展示了多肽邻苯二胺亚硝酸钠活化法在主链首尾相连的环肽天然产物的全合成中的应用。环肽SFTI-1的制备表明本文方法适用于多肽的分子内连接。而环肽lactocyclicin Q的全合成则证明多肽邻苯二胺可被进一步修饰的特性在某些情况下有助于提升蛋白质化学合成的效率。在lactocyclicin Q的制备过程中,由于一段多肽片段的溶解性不佳,第二步连接反应的产率较低。通过使用附加了助溶性精氨酸标签的多肽邻苯二胺代替最初使用的多肽酰肼,该溶解性问题得到了解决,连接产率得到了显著提升。