肾细胞癌的彩色血管平均密度与病理微血管密度对比研究

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目的:本研究应用两种定量计测肿瘤血管的方法——彩色血管能量成像(Color power angiography ,CPA)技术计测的新指标彩色血管平均密度(Mean color vessel density, MCVD)和免疫组织化学染色方法计测的微血管密度(Microvessel density, MVD),比较它们在评估肾细胞癌血供情况的作用。在免疫组织化学染色方法中,比较抗CD34多克隆抗体及抗Ⅷ因子相关抗原(Factor-Ⅷ-related antigen,F8RA)单克隆抗体两种血管内皮细胞标记物的敏感性,寻求肾细胞癌微血管的最佳标记物,计数MVD,并与 MCVD对比,分析肾细胞癌的血供特征,探讨CPA定量检测肿瘤血管的病理学基础及优缺点,评价其在术前估测肾细胞癌转移、预后的临床价值。材料和方法: 38例肾细胞癌患者均为我院2001年3月~2002年11月住院病人。术前对所有病例进行超声检查。首先应用常规超声检查,观察肾脏内病灶大小、形态、位置、深度(记录肿瘤中心至皮肤表面的距离)、与周围组织的关系及有无淋巴结转移、静脉栓子等。启动CPA显示肿瘤区域血管分布特征,根据血管形态及血供丰富程度进行分级(Ⅰ~Ⅲ级),选择满意图像MO存储,输入计算机,应用软件计算MCVD。术后对肿瘤组织标本切片行免<WP=5>疫组织化学染色,标记物分别为CD34、A-F8RA,分别计测MVD值,并将上述结果结合肾细胞癌Robson分期进行对比分析。结果:⑴ 38例肾细胞癌用免疫组织化学方法标记肿瘤组织血管内皮细胞( vessel endothelial cell, VEC)全部着色,可见着色微血管形态不规则,分布不均,排列杂乱。CD34及A-F8RA计数的MVD均数分别为60.00±31.74/400倍视野、25.82±12.48/400倍视野。⑵ 肾细胞癌各临床分期CD34标记的MVD均数分别为59.65±32.69/400倍视野、66.35±33.71/400倍视野、49.58±27.14/400倍视野;A-F8RA标记的MVD均数分别为27.91±14.07/400倍视野、27.00±13.06/400倍视野、21.53±9.43/400倍视野。将MVD和肾癌Robson分期两变量进行spearman等级相关分析,结果表明肾细胞癌临床分期与MVD无明显相关(p>0.05)。⑶ 38例经手术切除的肾细胞癌,术前均应用CPA对其进行肿瘤血管半定量分型,CPA显示Ⅰ型7例(18.4%),瘤内或瘤周仅见斑点状血流信号;Ⅱ型21例(55.3%),瘤内血流规则分布,呈条状、分枝状或瘤周可见弧型血管包绕伴分支伸入;Ⅲ型10例(26.3%),瘤内血管迂曲,血流分布杂乱,呈树枝状且瘤周可见包绕血管伴分支伸入。Ⅰ~Ⅲ型MVD均数各为68.52±45.04/400倍视野、54.09±28.16/400倍视野、64.45±29.00/400倍视野。组间MVD比较无统计学意义(p>0.05)。⑷ 38例肾细胞癌MCVD与MVD进行spearman等级相关分析,二者呈正相关(r=0.344,p≤0.05)。⑸ 38例肾细胞癌各临床分期的MCVD均数分别为0.1962±0.1120、0.2302<WP=6>±0.1557、0.2069±0.0972。将MCVD和肾癌Robson分期两变量进行spearman等级相关分析,结果表明肾细胞癌临床分期与MCVD无明显相关(p>0.05)。结论:⑴ 用CD34单克隆抗体进行免疫组织化学染色较F8RA多克隆抗体更敏感,能突出显示较小的、不成熟的微血管,以其计数的MVD反映了肾细胞癌新生血管的状况,故本课题第二部分选用CD34作为肾细胞癌血管内皮标记物。⑵ CPA可敏感显示肾癌血供及其分布特征,但CPA半定量分析与MVD进行统计学比较,不能作为肾细胞癌的预后指标。⑶ CPA定量分析指标MCVD与MVD进行比较,二者呈正相关,说明MCVD能间接反映肾细胞癌血管生成状况,可作为肾细胞癌预后评价的指标,且较MVD能更好的反映肿瘤的整体血供。⑷ CPA测定肿瘤血管生成的新指标——MCVD的准确性有一定的限制,如检查者的经验、仪器的调节和肿瘤的深度等。
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