【摘 要】
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该研究应用5端标记生物素(Biotin)的引物PCR扩增淋球菌隐蔽型质粒DNA,将扩增产物与预先包被于微孔板上的探针进行反向杂交,利用扩增片断上标记的Biotin与杂交液中偶联过氧化
【出 处】
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上海医科大学 复旦大学医学院 复旦大学
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该研究应用5端标记生物素(Biotin)的引物PCR扩增淋球菌隐蔽型质粒DNA,将扩增产物与预先包被于微孔板上的探针进行反向杂交,利用扩增片断上标记的Biotin与杂交液中偶联过氧化物酶的链亲和素蛋白结合,与底物作用显色反应,经光密度测定诊断淋球菌感染.为提高杂交效率,该研究构建了噬菌粒pUC-SfiI×2克隆载体,运用重组DNA技术获得含不同数目串联重复序列探针质粒,经转化大肠杆菌(E.Coli),通过辅助病毒感染制备单链DNA探针.研制单链DNA包被的最适方法和杂交条件,比较不同数目串联重复序列探针与单探针的杂交效率,并与双链DNA探针杂交效率作对照.
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