即时检验纸基生物传感芯片的构建及应用

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严重发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒(SFTSV)是最新发现的易感性和死亡率较高的新型布尼亚病毒。感染案例的增加引起了公众的关注。然而,目前针对该病毒的研究处于萌芽状态,尚未发现有效的方法和疫苗对其治疗和防治,此外,对于发病机制的了解也十分有限。目前,核酸检测和免疫学的方法检测是科学研究中SFTSV惯用检测方法,但是这类检测方法不仅耗费成本高且操作步骤冗长繁琐。为了有效筛查和检测病毒,监测疾病传播,一种快速且准确的检测方法的研究具有非常重要的意义。另一方面,纸基芯片(μPADs)因为具有样品消耗少、检测速度快、操作步骤简单、多功能集成化、便携式、微型化等特征,所以应用前景非常广阔,尤其体现在资源有限的偏远地区、日常即时检验(POCT)以及疾病前期筛查诊断的应用中。因此本文利用μPADs构建快速检测SFTSV的有效方法,为其定性定量化分析提供了更多可能。本论文具体研究内容简单概括如下:1.基于金修饰的纸基芯片和量子点电化学发光构建生物免疫传感器检测新型布尼亚病毒在本章中,我们首次采用原位生长法制备的全通量导电性优异的金纸基电极(Au-PWE)用于灵敏地检测SFTSV。利用喷蜡打印机批量生产μPADs,基于量子点电化学发光(ECL)构建三明治结构的夹心免疫传感器的分析方法定量检测SFTSV。在检测过程中,量子点的ECL强度随着SFTSV抗原浓度的增加而增加,检测灵敏度可达0.1pg/mL(S/N=3),线性范围为0.0001-50 ng/mL。实验结果显示,基于Au-PWE和量子点ECL可以构建灵敏度高、选择性好、良好的重复性和稳定性的SFTSV生物传感器。本章研究对于SFTSV的前期诊断以及监控,甚至开发其它分析物的便携低成本POCT芯片具有重要的参考价值。2.基于胶体金免疫层析纸基试纸条快速检测新型布尼亚病毒在本章中,通过结合纸基侧流免疫层析试纸条(LFITSs)本身的特性和胶体金(Au NPs)的光学性质,我们首次呈现一种快速检测SFTSV的免疫分析方法。纸基LFITSs结构简单,成本效益高,10 min内即可完成整个SFTSV检测过程,检测结果准确且稳定。在最优的实验条件下,仅仅依靠于可视化的检测线(TL),纸基LFITSs检测限可达到1 ng/mL,并且整个测试过程仅需要50μL的分析液。本章中所研发的纸基LFITSs简单便携、快速低成本、稳定性好、特异性好,不仅为SFTSV提供了重要的检测手段,而且也为日常生活中POCT芯片的广泛应用开辟了新的可能性。
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