对虾白斑综合症病毒(WSSV)是危害养殖对虾的最主要病原,其致病能力强,传播范围广,给世界对虾养殖业造成了巨大的损失,然而至今仍无有效的防治方法。本论文开展了对虾免疫信号因子Rab蛋白在对虾免疫过程中的作用机理研究,同时探索WSSV病毒膜蛋白在感染过程中的作用,从病毒和宿主两方面入手,为建立有效的防治方法提供科学依据。通过3’RACE和5’RACE获得对虾Rab基因(命名为PjRab)的cDNA全长,其ORF为636bp,编码212个氨基酸。序列分析发现,PjRab具备Rab蛋白的基本特征,但在C-端与已知的Rab蛋白不同,可能是一种新的Rab蛋白,这是首次在海洋无脊椎动物体内克隆到该基因。对该基因进行了原核表达,并得到了有活性的表达产物。RT-PCR和Western blot分析发现,PjRab在对虾组织中均有转录和翻译。Real-time PCR分析发现,在受到病毒刺激后PjRab基因表达上调,说明PjRab参与了对虾的免疫过程。通过GST-pull down、质谱等方法,发现PjRab蛋白与肌动蛋白(actin)、原肌球蛋白(tropmoyosin)以及对虾白斑综合症病毒的膜蛋白VP466之间存在互作。体外和体内试验证明,PjRab与actin之间存在相互作用。采用抗体抑制Rab蛋白、RNAi抑制Rab基因表达、体外注射mRNA等方法,结果都证明Rab参与了血细胞的吞噬过程。因此,Rab蛋白参与抗病毒免疫的一条可能途径是,通过与actin的互作,调控血细胞的吞噬活性。这是动物中首次发现这一新途径,我们的研究结果拓展了对小G蛋白在免疫反应中的作用的认识。采用抗体中和试验发现,WSSV被VP28、VP68、VP281和VP466的抗体中和后能延缓对虾的死亡,PCR进一步证实了这一结果。因此,这4种病毒膜蛋白在WSSV的感染过程中起重要作用。为了进一步了解膜蛋白的作用,选择VP466进行研究。通过FITC标记、GST pull-down、质谱分析,发现了VP466的互作因子——ATP合成酶。克隆了对虾ATP合成酶基因的完整阅读框,该基因ORF含有1431bp,编码477个氨基酸。昆虫细胞内的互作试验表明,VP466与ATP合成酶存在相互作用。