壁虎匀浆液抗小鼠肾包膜下移植H22肝癌的实验研究

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目的壁虎是我国传统的中药材,药理学研究发现壁虎具有抗肿瘤作用,特别是对肝癌等消化系统肿瘤实体瘤作用显著,其在治疗消化系统肿瘤方面表现出了较深的研究价值。目前,壁虎抗肿瘤的体内试验作用机制和作用靶点尚未完全阐明。本实验旨在用壁虎匀浆液(Gecko homogenates,GH)抗肾包膜下移植H22肝癌小鼠模型,研究其在体内的抗肿瘤作用,并探讨其作用机制,为壁虎在临床抗肿瘤方面的应用提供实验基础和科学依据。方法建立肾包膜下移植H22肝癌小鼠模型,将50只昆明小鼠(雄性)随机分为模型组(生理盐水)、阿霉素(ADR)组(0.002g/kg)、壁虎匀浆液高剂量组(5g/kg)、壁虎匀浆液中剂量组(2.5g/kg)、壁虎匀浆液低剂量组(1.25g/kg),共5组。给药6天后,称重荷瘤小鼠体重,计算被处死前体重(FBW)与给药前体重(IBW)的比值,判断药物对荷瘤小鼠的毒性反应;杀鼠取瘤,测量小鼠移植瘤的大小、重量,并称取荷瘤小鼠胸腺、脾脏重量,分别计算抑瘤率、胸腺指数、脾脏指数;用SP免疫组化法对血管内皮生长因子(VEGF)的表达进行检测;采用ELISA法检测荷瘤小鼠血清中IL-6、TNF-α蛋白水平;对荷瘤小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和血肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)进行检测;HE染色观察小鼠肝、肾的组织形态学变化。结果体内实验结果显示,壁虎匀浆液可抑制小鼠肾包膜下移植H22肝癌的生长,阿霉素(ADR)组、壁虎匀浆液高、中、低剂量组的抑瘤率分别为87.35%、85.47%、67.14%、42.33%;HE染色,光学显微镜下观察到壁虎匀浆液各组移植瘤细胞排列疏松,有纤维组织包裹,瘤细胞以多边形为主,大小不一,核质比例减小,核呈圆形淡染,核仁小而不明显,且可见不同程度的片状坏死区,可见凋亡细胞,肿瘤细胞周围可见淋巴细胞和巨噬细胞浸润;移植瘤组织免疫组化显示,与模型组比较,壁虎匀浆液各组VEGF蛋白的表达明显减少,有统计学意义(P<0.05);壁虎匀浆液能使荷瘤小鼠血清中IL-6蛋白的含量不同程度的降低,TNF-α蛋白的含量不同程度的升高,与模型组相比具有明显的统计学意义(P<0.01);壁虎匀浆液各剂量组的胸腺指数、脾脏指数和白细胞计数与模型组比较差异无统计学意义(P>0.05);壁虎匀浆液高、中、低剂量组小鼠终末体重/初始体重的比率分别为0.9032、0.9247、0.9074,均大于0.8,与模型组(FBW/IBW=0.9379)比较差异无统计学意义(P>0.05);壁虎匀浆液高、中、低剂量组荷瘤小鼠的肝脏、肾脏形态正常,与模型组比较,均未发现有毒性损害的病理学改变;血清生化结果显示:与模型组相比,阿霉素组荷瘤小鼠血清ALT、AST、BUN、Cr含量明显增高,有统计学差异(P<0.05),壁虎匀浆液高、中、低剂量组荷瘤小鼠血清BUN、Cr、ALT、AST比较差异无统计学意义(P>0.05)。与阿霉素组比较,壁虎匀浆液高、中、低剂量组荷瘤小鼠血清ALT、AST、BUN、Cr含量降低,有统计学意义(P<0.05)。结论壁虎匀浆液在体内可抑制肾包膜下移植H22肝癌的生长;壁虎匀浆液对荷瘤小鼠的免疫功能无影响,对肝功能和肾功能无损害,毒副作用小;其抗肿瘤作用机制可能是通过降低VEGF蛋白和IL-6蛋白的表达,增强TNF-α蛋白的表达,从而抑制肿瘤血管的生成、诱导细胞凋亡而实现的。
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