香蕉枯萎病是由尖孢镰刀菌古巴专化型(Fusarium oxysporum f.sp.cubense,Foc)引起的一种全球性香蕉病害,严重危害世界香蕉产量。但是,Foc如何致病及其致病因子如何被调控,还缺深入研究。经外泌途径分泌的胞外水解酶、毒素以及特定的效应蛋白,可能是其重要致病因子。为此,在本研究中我们重点分析了 Foc中胞吐复合体的生物学功能并初步探索这一关键分泌途径在Foc致病中的作用。首先,利用Pull-down及质谱测序技术,验证了在Foc胞吐复合体是由八个元件组成的,分别为:FocSec3,FocSec5,FocSec6 FocSec8,FocSec10,FocSec15,FocExo84 和 FocExo70。然后,对胞吐复合体在Foc中的亚细胞定位进行系统的分析,发现八个胞吐复合体原件均定位于健康生长菌丝的尖端并位于顶体前方及老熟菌丝的隔膜处;我们在禾谷镰刀菌(Fgraminearum)中和稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)中也观察了 Exocyst部分元件的定位情况,其中菌丝尖端的定位模式都存在于这两种丝状真菌中,胞吐复合体在菌丝隔膜的定位模式在稻瘟病菌(M.oryzae)菌丝膈膜处也有发现,但在禾谷镰刀菌(Fgraminearum)中并未观察到。同时,发现在Foc中胞吐复合体菌丝尖端的定位依赖于细胞骨架微管和微丝的转运参与极性胞外分泌过程,然而隔膜处的定位只依赖于微管可能与非极性胞外分泌过程相关。除此之外,胞吐复合体的完整性和其与尖端膜结构结合的助手蛋白Sec4的存在对于其亚细胞定位是必需的。在Foc中组成胞吐复合体的八个元件中,只有FocSec5和FocExo70的编码基因能成功被敲除,均表现出生长速率减缓,产孢量降低,以及致病力降低,其中△Focexo70还出现菌丝形态的变化,说明了胞吐复合体参与Foc生长发育过程及致病过程的调控。在禾谷镰刀菌(Fgraminearum)中我们发现了相同的现象,只有FgEXO70和FgSEC5能被成功敲除,且△Fgexo70 和△Fgsec5也都表现出生长产孢,以及致病力的缺陷,从而揭示了胞吐复合体在镰刀菌中具生物学功能保守性。除此之外,△Focexo70的外泌蛋白数量相较野生型明显减少,其中存在部分突变体缺少的蛋白为已报道的参与丝状真菌致病过程的蛋白。本研究初次阐明胞吐复合体在Foc的生长发育及其致病过程的重要作用,将为进一步探究Foc致病机制提供参考依据。