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香菇(Lentinula edodes)子实体的形成是香菇整个生活史中最复杂也是最重要的发育过程,需要环境、遗传、生理等多个因素相互作用。研究子实体发育相关基因一直是食用菌领域中个重要的研究内容。正常的香菇子实体分化形成菌盖、菌褶和菌柄。香菇球形子实体是在湖北省随县三里岗镇发现的香菇正常子实体中的变异类型,整个子实体成球形,菌盖不开伞,菌柄不伸长,菌褶未见分化。经过组织分离获得纯培养菌种,进行再次栽培试验,仍然长出球形子实体。本试验以子实体为球形的香菇菌株为材料,利用DDRT-PCR技术克隆及分析了该菌株在菌丝、原基、子实体三个阶段基因。试验采用3条锚定引物和26条随机引物进行PCR扩增,其中只有14条随机引物可以扩增出重复性好、数量多且清晰地条带,扩增结果以PA和PC为锚定引物反转录获得的cDNA模板最好。得到稳定的差异条带41条,经过反向Northern点杂交验证出阳性差异片段17条,假阳性率为58.54%。克隆测序后在Genbank数据库中进行BLAST同源分析,17条差异片段中有7条片段与已知的基因序列和蛋白序列具有较高的相似性。差异片段GP20-540与香菇LephrA基因AB279630.1具有98%的相似性,推测其可能是编码蓝光受体A的基因,参与类胡萝卜素的生成、生物钟的重设等功能;差异片段AP10-302编码的蛋白与泉古菌(uncultured crenarchaeote)45-H-12归位内切酶Ⅰ-ApeⅡ具有38%的相似性,推测其可能和蛋白质剪接相关;差异片段CP16-324编码的蛋白与土曲霉(Aspergillus terreus)天冬氨酸激酶具有43%的相似性,推测其可能编码天冬氨酸激酶,参与赖氨酸的生物合成;差异片段CP18-394编码的蛋白与烟曲霉(Aspergillus fumigatus)的热激蛋白90辅助分子伴侣序列具有41%的相似性,推测其具有抗逆以及作为分子伴侣维持蛋白稳定和激酶活性;差异片段GP7-502编码的蛋白与双色蜡蘑(Laccaria bicolor)的糖苷水解酶家族2蛋白具有50%的相似性,推测其可能和糖代谢有关;差异片段CP20-321编码的蛋白与灵芝(Ganoderma lucidum)的金属硫蛋白具有54%的相似性,推测其可能在重金属解毒、金属离子运输及动态平衡的维持、离子代谢以及活性氧的清除等方面起作用;差异片段AP21-479编码的蛋白与灰盖鬼伞(Coprinopsis cinerea)的假定蛋白CC1G01848具有60%的相似性,但该蛋白的具体功能有待研究。进一步比较香菇正常子实体和球形子实体发育相关基因的差异,对克隆和分析香菇子实体发育相关基因具有重要意义。