肝癌是最常见的恶性肿瘤之一,肝癌的早期诊断是提高患者生存率的关键。目前的肝癌诊断主要是通过包括甲胎蛋白(alpha fetoprotein, AFP)的血清学水平检测并结合肝脏的影像学检测进行的超声造影,但是由于缺乏足够的诊断敏感性而难以实现肝癌的早期诊断。因此,发现新的血清蛋白标志物对于肝癌的临床诊断具有重要价值,目前通过分析肝癌组织和健康组织中蛋白质表达水平的差异,已经发现了许多潜在的蛋白质标志物,但大部分都没有经过血清学的鉴定研究。为此,本文拟通过抗体芯片技术来开展肝癌潜在血清标志物的鉴定研究。目的：建立一种基于抗体芯片的通量化检测技术,应用于肝癌潜在血清标志物的鉴定研究,为肝癌的早期诊断和预后监测奠定基础。方法：在醛基修饰的玻片表面制备了针对14种肝癌潜在血清蛋白标志物的抗体微阵列,按照标准的临床血清样本采集程序共采集了44例肝癌和46例健康者的血清样本,采用对血清样本直接进行生物素标记的抗体芯片分析策略,通过对肝癌患者与健康者血清样本中这些潜在蛋白标志物的表达水平进行差异分析,来实现对这些潜在标志物的血清学鉴定。结果：建立起了针对直接标记血清样本的抗体芯片分析技术的优化条件：如采用5%的脱脂奶粉作为芯片的封闭剂,室温封闭1小时；在生物素标记试剂与血清蛋白的质量比为1：40,血清样本的最终稀释比例为1：200时,可获得理想的芯片检测效果。抗体芯片对90例血清样本的初步检测结果表明HSP70、CK19、GPC3、PTMA、AFU、GP73、HBXAg、CA125等8种潜在蛋白标志物的表达水平在肝癌和健康者血清中存在统计学差异,8种血清蛋白潜在标志物指标联合检测肝癌的阳性预测率可达到88.6%、特异性达到97.8%。结论：所建立的基于血清样本生物素直接标记的抗体芯片分析策略,是一种有效的可同时检测多种蛋白指标在血清中表达情况的通量化分析技术,不仅可以完成14种肝癌潜在标志物的血清学鉴定,而且也可以通过扩展研究实现对更多肝癌潜在标志物的鉴定以及为其他疾病潜在标志物的血清学鉴定提供可借鉴的研究手段。