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第一部分 塞来昔布对培养的人脐血单核细胞环氧化酶及核因子κB表达的影响 背景:动脉粥样硬化(AS)是一种炎症性疾病已得到学者们公认,但尚未找到针对炎症机制的理想干预策略。环氧化酶(COX)-2与炎症及AS密切相关,其抑制剂有可能抑制AS进展。单核/巨噬细胞是代表AS炎症过程最重要的细胞成分,COX-2抑制剂对该类细胞的影响如何是进一步探讨其能否通过抗炎而抑制AS的研究基础和重要依据。 目的:研究特异性COX-2抑制剂塞来昔布对体外培养的人脐血单核细胞(HUBMC)的COX-1、COX-2及核因子-kappa B(NF-κB)基因表达的影响。 方法:Ficoll密度梯度离心+粘附分离法体外分离、培养HUBMC,以人白细胞介素-1β(IL-1β)作为刺激因子,分为空白组,溶剂对照(IL-1β+DMSO)组,IL-1β+塞来昔布组和IL-1β+阿司匹林组,分别予以溶剂(0.1%DMSO,1%DMSO)、DMSO溶解的阿司匹林(0.05mM,0.1mM,0.5mM,1.0mM)或DMSO溶解的塞来昔布(1.0μM,2.5μlM,5μM,10μM)进行预孵育,1小时后加IL-1β(10ng/ml),16小时后收集细胞,Trizol法提取总RNA,逆转录法进行cDNA合成,PCR法扩增COX-1、COX-2及NF-κB p65,半定量分析各基因的mRNA表达水平。 结果:各组HUBMC均表达COX-1 mRNA,空白组明显高于其他组(P<0.01);较之于溶剂对照组,各浓度塞来昔布、各浓度阿司匹林组的COX-1 mRNA表达均无显著性差异(P均>0.05)。未予IL-1β刺激的空白组无COX-2 mRNA表达;较之于溶剂对照组,5μM、10μM塞来昔布组COX-2 mRNA表达均减少(P<0.05、0.01);而各浓度阿司匹林组均无显著性差异(P均>0.05)。较之于溶剂对照组,空白组NF-κB p65呈低表达(P<0.01);各浓度塞来昔布组NF-κB p65表达均减