【摘 要】
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乳清蛋白(whey protein)是从牛奶中提取的一种高营养价值的蛋白质。乳清蛋白肽是乳清蛋白的水解产物,易于被人体消化吸收,具有抗氧化、降血糖、抗炎、调节机体代谢等多种生物活性,被誉为―精华中的精华‖。本论文选用碱性蛋白酶酶解乳清蛋白制备抗炎活性肽,并优化了超滤、Sephadex G-25凝胶柱层析和RP-HPLC制备液相的分离条件。从乳清蛋白酶解物<1kD部分中分离鉴定,并合成得到8条
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乳清蛋白(whey protein)是从牛奶中提取的一种高营养价值的蛋白质。乳清蛋白肽是乳清蛋白的水解产物,易于被人体消化吸收,具有抗氧化、降血糖、抗炎、调节机体代谢等多种生物活性,被誉为―精华中的精华‖。本论文选用碱性蛋白酶酶解乳清蛋白制备抗炎活性肽,并优化了超滤、Sephadex G-25凝胶柱层析和RP-HPLC制备液相的分离条件。从乳清蛋白酶解物<1kD部分中分离鉴定,并合成得到8条具有抗炎活性的肽段。其中,两条肽段DYKKY和DQWL是首次报道的多肽,其组成分别为Asp-Tyr-Lys-Lys-Tyr、Asp-Gln-Trp-Leu。本课题对抗炎活性肽在小鼠巨噬细胞RAW264.7中对炎症因子(TNF-α、IL-1β和COX-2)mRNA和蛋白表达量的影响进行了研究。实验结果表明,肽段DQWL在浓度10和100μg/mL两个浓度水平上均表现出最强的抗炎活性。通过对其抗炎机理的初步研究,发现DQWL可能的抗炎机制为:通过调节NF-κB通路中p65的核转位,抑制IKKα/β的磷酸化和IκBα的降解以及参与抑制与NF-κB通路有关的MAPK途径中p38的表达。本论文发现乳清蛋白中的新肽段DQWL具有潜在的抗炎活性。利用多步分离纯化手段,获得纯度较高的多肽组分,为今后多肽的提取分离及组成分析提供了借鉴。此外,所发现的新肽段序列,为日后乳清蛋白抗炎活性肽在功能性食品、食品强化剂和化妆品的开发上提供了科学指导。
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