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黏膜是动物有机体与外界环境相隔的最大屏障,是病原体入侵的最大门户。黏膜免疫系统是指外周淋巴器官中的黏膜部分,分主抗原接触部分和初次应答诱导部位以及一些大的表面区域(消化道、呼吸道、泌尿生殖道、外分泌腺等)。黏膜免疫是有机体抵御感染的最重要手段。黏膜免疫的主要效应因子是分泌型IgA(Secretory IgA),不仅可以中和、排斥病原体、防止细菌、病毒与黏膜结合,而且还可以促进外分泌液中天然抗菌因子作用,并可调节黏膜免疫。黏膜免疫由于它的特殊地位,在机体与外界环境相互作用中发挥着重要作用,黏膜免疫系统中的免疫活性成份越来越引起人们的重视。本文通过双抗体夹心ELISA检测商品肉牛的口腔、胃(瘤胃、网胃、瓣胃、皱胃)、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠、直肠、鼻、支气管、肺、膀胱、尿液、泪液、胆汁、扁桃体等器官的分泌液中的IgA含量,来反映黏膜抗体IgA在消化道、呼吸道、泌尿生殖道等组织器官的大致分布状况。全文共分三部分:前言:概述了黏膜免疫系统及其功能,黏膜免疫应答的过程,黏膜免疫的细胞免疫和体液免疫等。黏膜免疫系统的研究不仅为传统的免疫学增加新内容,也为很多疾病的致病机理、病原与宿主的关系、疾病诊治、新型疫苗与预防制剂等研究提供了新的思路与方法。正文:本研究将牛初乳经10000r/min离心所得的乳清过葡聚糖G-200凝胶层析柱得IgA和IgG混合蛋白,再过纤维素DEAE-52柱纯化牛IgA,经SDS-PAGE电泳鉴定为电泳纯IgA。免疫兔制备兔抗牛IgA抗体,然后用辣根过氧化酶标记,制备兔抗牛IgA酶标抗体。同时将牛IgA免疫小鼠,制备出小鼠抗牛IgA抗体,应用本实验建立的双抗体夹心ELISA对采集的各黏膜部位(每个部位30个样品)进行检测。详述检测结果,由双抗体夹心ELISA OD值与IgA含量回归方程得到各部位IgA含量,并讨论。结论:成功的建立了检测肉牛黏膜IgA的双抗体夹心ELISA方法。根据建立的方法检测样品,结果显示:消化系统、呼吸系统、泌尿系统、泪液、胆汁、扁桃体黏膜部位的分泌液中均有IgA分泌,其中IgA含量较多的部位依次为瘤胃、胆汁、空肠、直肠、网胃、扁桃体;较少的依次为十二指肠,皱胃,盲肠。