新型光敏剂的光动力治疗在胆管癌中的实验研究

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目的本实验研究通过细胞水平和活体动物,来探讨新型叶绿素类光敏剂--2-1-己氧乙基-2-去乙烯基卟吩e6三钠盐(HCE6)的光动力疗法对于QBC939系胆管癌细胞和荷瘤裸鼠模型的光动力治疗效果,并进一步研究探讨其量效关系。方法用细胞增殖与毒性检测试剂盒(CCK8)检测652nm不同激光光强度(0.6J/cm2,1.8J/cm2,2.7J/cm2,5.4J/cm2)及不同浓度光敏剂HCE6 (0μg/ml、0.3 μg/ml、0.5μ g/ml、1.0μg/ml、15μg/ml、2.0μg/ml)光动力处理下QBC939系人胆管癌细胞的增殖率,找出此光敏剂光动力疗法抑制瘤细胞最适光疗剂量和光敏剂浓度。并比较最适光疗剂量下光毒性与暗毒性差异。建立QBC939系人胆管癌细胞荷瘤裸鼠模型,将其分为对照组和实验组,两组都进行尾静脉注射光敏剂0.5mg/kg,24h后光动力组接受激光治疗(激光剂量:120J/cm2,功率0.2w,治疗20mmin),而对照组不给予激光治疗,两组裸鼠均需避光饲养。在激光治疗后Id、3d、5d、7d、9d、11d、13d、15d观察、记录并计算实验组和对照组裸鼠瘤体体积,并比较实验组与对照组瘤块体积大小以及变化差异,绘制肿瘤体积-时间变化曲线。并与第15d断颈法处死裸鼠,取其肿瘤置于10%甲醛中固定,浸蜡包埋,制作切片,并HE染色,光镜下观察,并对比观察瘤体病理变化。结果HCE6-PDT处理瘤细胞的最适光疗强度2.7J/cm2剂量,最适光敏剂浓度为1.5μg/m1;在这个光照轻度和光敏剂浓度下,增加光照强度和光敏剂浓度,胆管癌细胞增殖率呈逐渐下降趋势,超过这个光照强度和光敏剂浓度,其与最适剂量下细胞增殖率无统计学差异(p>0.05)。荷瘤裸鼠模型实验中,实验处理后的每天,实验组和对照组都有明显肿瘤体积差异(p<0.05)。光动力治疗第15d,实验组瘤块体积0.5-/+0.010cmm3,而对照组2.25-/+0.015cm3,实验组与对照组体积差异明显(p<0.05)。结论无论细胞水平还是活体动物实验都表明新型光敏剂HCE6光动力治疗对QBC939系人胆管癌细胞生长具有明显的抑制作用。
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