论文部分内容阅读
本文对采自广东湛江硇洲岛的半叶马尾藻,进行了岩藻聚糖硫酸酯提取工艺的优化研究。对半叶马尾藻粗岩藻聚糖硫酸酯进行分离、纯化,并研究其抗氧化和降血脂功能活性,为开发和利用这一资源提供理论依据。
通过常规成分分析得出半叶马尾藻的基本化学组成为:水分11.53%,蛋白质7.69%,脂肪1.60%,粗纤维8.95%,灰分16.80%,总碳水化合物53.40%
以多糖提取率和硫酸基含量为指标,分别讨论了温度、提取时间、加水量及pH值对半叶马尾藻粗岩藻聚糖硫酸酯提取率和硫酸基含量的影响程度,并根据L9(34)正交表综合分析确定最佳提取工艺条件为:pH值1.5,温度70℃,料液比40及时间6h,在此条件下提取岩藻聚糖硫酸酯得其得率为8.73%,硫酸基含量为13.16%。
研究CaCl2法,乙醇分级沉淀法,CTAB法三种方法对纯化的影响,采用DEAEC-52离子交换柱层析对纯化后的岩藻聚糖硫酸酯进行分级纯化,并对各组分的化学组成进行分析。分析得出CTAB沉淀法进行纯化,优于乙醇沉淀法和氯化钙沉淀法。岩藻聚糖硫酸酯经DEAEC-52柱层析得F-1,F-2,F-3三个级分,半叶马尾藻岩藻聚糖硫酸酯的化学组成为:岩藻糖、糖醛酸、硫酸根和少量蛋白质。随着纯度的提高,岩藻糖与硫酸根的含量增加,进而说明岩藻糖与硫酸根为主要组成。
采用薄层层析和红外光谱对岩藻聚糖硫酸酯的单糖组成和化学结构进行分析得出岩藻聚糖硫酸酯的主要单糖为岩藻糖,半乳糖和葡萄糖醛酸其比例大约为2.5:1:0.5。红外光谱分析表明,岩藻聚糖硫酸酯中含有有机的硫酸基,岩藻糖和糖醛酸的特征吸收峰,与化学分析相符,通过进一步分析硫酸基可能连接在岩藻糖的C2或C3位上。
采用邻二氮菲-Fe2+氧化法和邻苯三酚自氧化法检测岩藻聚糖硫酸酯各级分清除超氧阴离子自由基和羟基自由基能力,初步探讨抗氧化效果。结果显示半叶马尾藻岩藻聚糖硫酸酯4个级分SPF、SPF1、F-1、F-2具有显著的抗氧化能力,其IC50分别为0.078mg/mL、0.135mg/mL、0.08mg/mL、0.111mg/mL,0.157mg/mL、0.238mg/mL0.24mg/mL、0.53mg/mL,且高于抗氧化剂抗坏血酸,并且纯度越高抗氧化能力越强,说明岩藻聚糖硫酸酯是主要的活性物质。通过建立实验小鼠高脂血症模型,探讨岩藻聚糖硫酸酯降血脂效果。结果显示不同剂量组的半叶马尾藻岩藻聚糖硫酸酯都具有调节血脂的作用,能显著降低血清总胆固醇(P<0.01)及甘油三酯(P<0.01)及低密度脂蛋白胆固醇(P<0.01)的含量,并可提高高密度脂蛋白胆固醇(P<0.05)的含量。