地肤提取物的杀螨活性及其作用机理的研究

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本研究以广泛分布于我国各地区的植物材料— — 地肤 KochiaScoparia (L.) Schrad 为研究对象,用不同极性的有机溶剂和不同提取方法对其进行了提取,并以广泛危害粮食、蔬菜、果树、经济类作物的 3 种叶螨为研究对象,对其进行了生物活性测定。通过测定山楂叶螨体内几种酶活性的变化,初步明确了地肤提取物对山楂叶螨的作用机理,同时对地肤氯仿提取物中的活性物质进行了初步分离和纯化。试验结果如下: 1. 触杀活性测定中,通过玻片法发现:在 3 种不同极性的有机溶剂(石油醚、氯仿、甲醇)提取物中,以氯仿提取物的生物活性最强,当浓度为 50mg 植物干粉/ml时,24h对朱砂叶螨的校正死亡率达到 95.95%,明显高于其他 2 种溶剂提取物;甲醇提取物次之(74.76%),石油醚提取物效果最差(38.83%)。叶片浸渍法测定结果同样表明地肤氯仿提取物对朱砂叶螨生物活性最强。 2. 3 种不同提取方法对植物材料进行提取,以温浸法提取率最高,超声波法次之,冷浸法提取率最低,且 3 种提取方法得到的提取物对朱砂叶螨的生物活性经 DMRT 法检测无明显差异。就所使用的溶剂而言,甲醇的提取率最高,氯仿次之,而石油醚提取率最低,说明溶剂极性越强,其提取率越高。 3. 地肤氯仿提取物经萃取,以氯仿的萃取率最高(98.13%),乙酸乙酯次之(1.26%),水萃取最低(0.61%)。3 种萃取物经玻片法活性测定,以氯仿部分生物活性最强,对二斑叶螨和朱砂叶螨的 LC50分别达到0.8086mg/ml 和 0.4914mg/ml。乙酸乙酯部分对二斑叶螨和朱砂叶螨的LC50 分别为 6.2924mg/ml 和 0.8031mg/ml,水部分分别为 7.5522mg/ml和 7.4671mg/ml。明显高于乙酸乙酯部分和水部分。叶片浸渍法生测仍表明地肤氯仿提取物中氯仿萃取部分生物活性最强。 4. 萃取物氯仿部分柱层析分离后,经 TLC 检验,相同成分合并,得到流分 11 个,经玻片法生物活性测定,流分 9(F9)生物活性最强,当浓度为 1mg 提取物/ml 时,24h 对朱砂叶螨和二斑叶螨的校正死亡率分别达到 94.87%和 77.01%。对二斑叶螨、朱砂叶螨和山楂叶螨的致死中浓度 1<WP=7>地肤提取物的杀螨活性及其作用机理的研究分别达到 0.3903mg/ml、0.2981 mg/ml 和 0.2568 mg/ml。F9 用氯仿:甲醇=97:3 作流动相,在 Rf?0.3 处,有 1 点,即活性物质,此点在自然情况下为绿色,在 254nm 光波下下呈暗褐色,而在 365nm 下为暗红色,具体成分有待于进一步研究。5. 用叶片残毒法对氯仿萃取物和 F9进行杀卵活性测试,结果表明:二者的杀卵效果很差,可能是药剂无法进入卵壳所致。6. 地肤氯仿提取物对朱砂叶螨生长发育影响的研究结果表明:氯仿提取物各浓度均有抑制朱砂叶螨卵发育的作用,而且浓度越高,抑制越强烈;对雌成螨的繁殖力研究结果表明:氯仿提取物对朱砂叶螨雌成螨的繁殖力有明显的抑制作用,浓度越高,抑制越强烈。7. 初步的作用机理表明:用地肤氯仿提取物对山楂叶螨处理后,体内的谷胱甘肽-S-转移酶(GST)活性大部分接近或大于对照组,说明对体内的 GST 有所激活;单胺氧化酶(MAO)的比活力小于对照组,活力受到了一定程度的抑制;Ca2+-ATP 酶活力受到了一定程度的抑制;羧酸酯酶活性有所激活。根据试验研究结果,本文就植物材料有效成分的提取、地肤提取物的杀螨生物活性、作用机理、活性物质的分离、需要解决的问题及应用前景等进行了讨论。
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