第一部分中医及中西医结合治疗小儿多发性抽动症临床研究Meta分析　　目的:为了系统评价中医及中西医结合治疗小儿多发性抽动症的临床疗效及不良反应，本研究通过Meta分析对研究质量的总体水平做出评估，以期获得真实、可靠的结论，为今后的临床实践和卫生决策提供较为科学、真实的依据。　　方法:利用计算机检索Cochrane图书馆、MEDLINE文献库、VIP、CNKI中国学术期刊全文数据库、万方中文科技期刊全文数据库、万方学位论文数据库等全文数据库，以及CBM数据库，并手工检索相关文献查找中医及中西医结合治疗小儿多发性抽动症的文献资料，提取相关数据对所纳入文献采用改良Jadad量表评分标准进行评分，使用RevMan4.2分析软件对临床总有效率、不良反应进行Meta分析。　　结果:共检出符合纳入标准的RCT31篇，合计患儿人数为2893例。中医及中西医结合治疗TS（干扰措施为氟哌啶醇片）临床疗效共纳入8篇文献，总体异质性x2检验P=0.17(P＞0.05)，OR=3.31，95％的可信区间为[2.11，5.19];中医及中西医结合治疗TS（干扰措施为氟哌啶醇合并安坦）临床疗效共纳入7篇文献，总体异质性x2检验P=0.83(P＞0.05)，OR=3.00，95％的可信区间为[1.66，5.42];中医及中西医结合治疗TS（干扰措施为泰必利片）临床疗效共纳入16篇文献，总体异质性x2检验P=0.20(P＞0.05)，OR=1.90，95％的可信区间为[1.49，2.42];中医及中西医结合治疗TS（氟哌啶醇对照）在不良反应方面共有4篇文献纳入，总体异质性x2检验P=0.18(P＞0.05)， OR=0.07，95％的可信区间为[0.04，0.14];中医及中西医结合治疗TS（泰必利对照）不良反应方面共有4篇文献纳入，总体异质性x2检验P=0.84(P＞0.05)，OR=0.18，95％的可信区间为[0.08，0.43]。　　结论:1.与单纯西药常规治疗相比，中医或中西医结合治疗小儿多发性抽动症具有更好的临床治愈率，并可以降低不良反应发生率。　　2.由于所纳入文献数量较少，质量偏低，故此研究结果尚不能确定完全适用于临床，其疗效优势有待于进一步研究，并需要更多的高质量、大样本、多中心随机双盲对照试验来验证。　　第二部分宁动颗粒调节TS模型大鼠CSTS环路DA代谢机制研究　　背景:抽动-秽语综合征(Tourette Syndrome，TS)亦称多发性抽动症，属于一种神经精神类疾病，其特征为无目的、无意识、重复的刻板活动，并常伴有强迫症(OCD)、注意力缺陷多动障碍综合征（多动症）(ADHD)和（或）情绪障碍。本病多见于3～8周龄的儿童，以男孩居多。近年来有关TS的病因及发病机制尚未完全明确，但大量的研究表明其与基底神经节、皮质-纹状体-丘脑环路及多巴胺神经元免疫功能异常密切相关。其中两种常见的单胺类转运体分别为位于神经元突触前膜上的多巴胺转运蛋白和5-羟色胺转运蛋白，两者直接参与了神经递质的代谢，在TS的发病过程中起着至关重要的作用。　　治疗TS的有效药物DRD2阻滞剂氟哌啶醇(Haloperidol，Hal)疗效肯定，但其副作用相对较大，如嗜睡乏力、镇静、头昏、椎体外系反应（静坐不能、肌张力障碍、帕金森氏病样震颤等）。宁动颗粒（Ningdong granule，NDG）是临床治疗TS的中药复方制剂，已临床应用多年，并显示出良好的疗效，但其具体作用机制尚不十分明确。　　本课题采用TS患儿血清诱导TS模型大鼠，观察宁动颗粒对TS大鼠刻板活动的影响;检测TS大鼠纹状体内DA含量、血清内HVA含量及多巴胺转运蛋白(DAT)蛋白及mRNA表达的强弱，初步探讨宁动颗粒对TS大鼠DA系统的影响，阐明宁动颗粒治疗TS的作用机制，为宁动颗粒治疗TS提供科学理论依据　　目的:1.观察宁动颗粒对TS血清诱导的模型大鼠刻板活动的影响。　　2.观察宁动颗粒对TS模型大鼠CSTSs纹状体内DA含量、血清中HVA含量的影响，以及DAT蛋白和mRNA表达，以进一步探讨宁动颗粒治疗TS的作用机制。　　方法:1.研究对象:36只6周龄雄性Wistar大鼠(160±20g)，在无菌操作下，使用微泵将TS患儿血清微注射入36只大鼠的纹状体内，诱导出TS模型大鼠后进行药物干预，将大鼠随机分为3组，每组12只，分别为:(1)宁动颗粒组(NDG);(2)氟哌啶醇组(Hal);(3)对照组(CTR)。NDG组给予宁动颗粒370mg/(kg·d)（相当于临床用量的15倍）;Hal组给予氟哌啶醇1.0mg/(kg·d)（相当于临床用量的10倍）;对照组给予等量蒸馏水。3组大鼠均灌胃给药，每日给药一次，于8:00～10:00进行，连续给药8周。末次给药后取各组大鼠的尾静脉血，分离血清后保存备用;麻醉并处死动物后取大鼠纹状体部位，将其分为4等份置于-80℃冰箱保存备用。　　2.研究内容:(1)TS模型大鼠药物干预后使用大鼠行为评分测定其刻板行为;(2)酶联免疫吸附剂测定法(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)检测纹状体内DA含量;(3) ELISA法检测大鼠血清中HVA含量;(4)免疫组织化学染色法检测纹状体内DAT蛋白表达的强弱;(5)蛋白免疫印迹(Western Blot)技术检测纹状体内DAT蛋白表达;(6) Real-time PCR法检测纹状体内DAT mRNA的表达。　　结果:1.TS模型大鼠药物干预后刻板行为研究　　微泵注射TS患儿血清后，TS模型大鼠的刻板行为明显增加，NDG组、Hal组及对照组相比无显著性差异(p＞0.05)。三组分别使用宁动颗粒、氟哌啶醇、蒸馏水干预后NDG组、Hal组大鼠刻板活动与对照组比较明显减弱(P＜0.01)，但NDG组与Hal组相比差异无统计学意义(P＞0.05)。　　2.纹状体中DA含量比较　　给药后NDG组大鼠纹状体内DA含量与Hal组、对照组DA含量相比明显降低，差异具有统计学意义(P＜0.05)。　　3.血清中HVA含量比较　　与对照组、Hal组相比，给药后NDG组大鼠血清HVA含量显著升高，差异具有统计学意义(P＜0.01)，但Hal组与对照组比较无明显差异，二者相比差异无统计学意义(P＞0.05)。　　4.免疫组织化学染色法检测纹状体内DAT蛋白表达比较　　与对照组相比，给药后NDG组大鼠纹状体内DAT蛋白表达明显升高，差异有统计学意义(P＜0.01)，但Hal组与对照组比较无明显差异(P＞0.05)。　　5.Western Blotting技术检测纹状体内DAT蛋白比较　　给药后，NDG组大鼠纹状体内DAT蛋白表达明显高于对照组，二者差异具有显著性(P＜0.01)，但Hal组及对照组之间相比无显著差异(P＞0.05)。　　6.大鼠纹状体内DAT mRNA表达比较　　与对照组比较，NDG组大鼠纹状体内DAT mRNA的表达明显升高(P＜0.05)。但Hal组大鼠纹状体内DAT mRNA表达与对照组相比无明显差异，差异无统计学意义(P＞0.05)。　　7.TS模型大鼠刻板行为与HVA含量、DAT蛋白表达之间相关性分析　　Pearson correlation coeficients分析显示:①宁动颗粒组大鼠治疗8周后其血清中HVA含量与刻板行为呈正相关关系(r=0.921，n=12，p＜0.001);②宁动颗粒组大鼠治疗8周后其HVA含量与DAT的蛋白表达呈正相关关系(r=0.857，n=12，p＜0.001);③宁动颗粒组大鼠治疗8周后其DAT的蛋白表达与刻板行为呈正相关关系(r=0.879，n=12，p＜0.001)，而在氟哌啶醇组无此类相关性体现(p＞0.05)。　　结论:宁动颗粒可以调节TS模型大鼠的刻板行为，具有明显抑制的作用，能抑制皮质-纹状体-丘脑环路DA系统的兴奋性，促进DA代谢，降低纹状体内DA含量，增加血清中HVA含量;同时宁动颗粒还可以提高纹状体内DAT蛋白及mRNA表达的作用。