转ZmZIP1、ZmPHD1产量相关性状基因玉米后代株系的分子特征及农艺性状分析

来源 :四川农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:weishuren33
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
玉米是全世界总产量最高的粮食作物之一,也是重要的工业原料,其产量和品质对人类有着至关重要的意义。在众多作物产量与品质的影响因素中,光合作用无疑是影响最大的因素。植物叶片中叶绿素含量的多少直接影响着植物的光合能力,提高叶片光合效率能够使叶片积累更多的光合产物,增加植株生物产量进而促使经济产量增加。除此之外,很多环境因子也对作物产量起着重要的影响。如微量元素锌,与植物体内的许多生理生化反应及叶片中叶绿素合成有关。玉米是一种对锌反应相对敏感的作物。缺锌时,玉米植株体内叶绿素含量下降,光合作用减弱,严重时可使玉米产量显著下降。本实验拟用已转化锌铁转运蛋白基因(ZmZIP1)的4个转化事件和葡萄糖差向异构酶基因(ZmPHD1)的8个转化事件的转基因玉米为实验材料,分别对其进行了PCR检测、Southern blot、实时荧光定量PCR、Western blot、细胞学观察以及相关生理指标与农艺性状的测定分析,明确了ZmZIP1基因和ZmPHD1基因的遗传情况、拷贝数、m RNA转录与蛋白质翻译水平的表达情况,以及目的基因对生理指标与农艺性状的影响,为后期育出高产转基因玉米新品种提供了材料基础和理论依据。本研究得到了以下结果:1.两类转基因材料共获得12个转化事件,其中转ZmZIP1基因玉米有4个转化事件,分别命名为ZmZIP1-(1-4);转ZmPHD1基因玉米有8个转化事件,分别命名为ZmPHD1-(1-8)。通过PCR检测目的基因片段,两个转基因材料各个转化事件在T0-T4代均能检测到目的条带,且在T4代对ZmZIP1-(1-4)共1008株植株、ZmPHD1-(1-8)共1960株植株进行PCR检测,每个转化事件均获得基因不再分离的纯和株系,表明ZmZIP1基因和ZmPHD1基因可在遗传世代间稳定遗传;2.在T4代,对转ZmZIP1基因玉米4个转化事件与转ZmPHD1基因玉米8个转化事件的标记基因PMI进行Southern blot分析。ZmZIP1-(1-4)杂交结果均显示一条杂交带,且在5148 bp-21226 bp范围内条带大小不一,阴性对照(CK)无条带;ZmPHD1-(1-8)的杂交结果表明,各转化事件均呈现一条杂交带,且在3530 bp-21226 bp区间内大小不一,阴性对照(CK)无杂交带;因此,ZmZIP1基因与ZmPHD1基因均呈单拷贝形式整合到玉米基因组中,且不同转化事件插入位点不同;3.在T4代,对ZmZIP1-(1-4)四叶一心时期的叶片分别进行实时荧光定量PCR和Western blot分析,结果显示,ZmZIP1基因在各转化事件玉米叶片中的相对表达量均显著高于对照(CK),其中ZmZIP1-2和ZmZIP1-3在0.01水平极显著高于对照(CK)10倍和12倍,Western blot显示ZmZIP1-(1-4)均能翻译出目的蛋白与PMI标记蛋白,蛋白分子大小分别为48 KD与38 KD,表明,ZmZIP1基因在玉米中转录水平上高效表达且能翻译出相应蛋白;对ZmPHD1-(1-8)四叶一心时期的叶片进行实时荧光定量PCR分析,通过对比可知,各转化事件叶片中ZmPHD1基因相对表达量均显著高于对照(CK),且提高倍数达5-170倍,表明ZmPHD1基因在转基因玉米叶片中得到了非常高效的表达;4.在T4代,对ZmPHD1-(1-8)于玉米灌浆期的叶片组织进行透射电子显微镜(TEM)扫描分析,与对照(CK)相比,转ZmPHD1基因植株叶绿体内淀粉粒数目明显增加,表明ZmPHD1基因能提高植物体内淀粉含量,促进叶绿体内糖类合成与转化;5.在T4代,对ZmZIP1-(1-4)测定结果显示,各转化事件叶绿素相对含量(SPAD)高出对照(CK)3.64%—17.89%,除ZmZIP1-4外,其余三个转化事件与对照差异均达到极显著水平,表明ZmZIP1能促进玉米叶片内叶绿素相对含量的提高;6.在T4代,对ZmPHD1-(1-8)在灌浆期对穗位叶进行叶绿素相对含量(SPAD)与光合速率测定,结果显示,与对照(CK)相比,各转化事件的叶绿素相对含量(SPAD)提高了3.69%—16.73%,且在相同光照强度条件下,转ZmPHD1基因玉米的光合速率比对照(CK)高18.75%—42.44%,差异显著性分析均达到极显著差异水平,同时,经测定各转化事件植株的光饱和点均高于对照(CK),表明ZmPHD1能促进玉米叶片内叶绿素相对含量的提高,且能够通过提高光饱和点来显著提高叶片光合能力;7.在T4代,对ZmZIP1-(1-4)与ZmPHD1-(1-8)的全部植株在玉米灌浆期进行植株表型测定,主要测量性状有叶长、叶宽以及叶面积。ZmZIP1-(1-4)测定结果显示,叶面积与非转基因对照(CK)相比,各转化事件叶面积高于对照(CK)0.74%—30.99%,表明ZmZIP1基因可增加玉米生物学产量;ZmPHD1-(1-8)测定结果显示,叶面积与对照(CK)相比,进行对比分析,结果显示各转化事件叶面积高于对照(CK)9.18%—50.50%。表明ZmPHD1基因可通过增加叶面积而达到增加植株生物产量的效果;8.在T4代,对ZmZIP1-(1-4)与ZmPHD1-(1-8)的穗部性状及籽粒性状进行考察分析,主要考察性状有穗长、穗粗、穗重、穗行数及百粒重与穗粒重等。ZmZIP1-(1-4)考察结果显示,与对照(CK)相比,穗长增加4.02%—14.93%,粒厚减小13.86%—21.76%,穗粒重增加23.25%—76.95%,其他性状无规律性变化;ZmPHD1-(1-8)考察结果显示,与对照(CK)综合相比,转ZmPHD1基因玉米籽粒粒长增加6.65%—12.93%,粒宽增加1.64%—10.24%,而粒厚减小了0.08%—21.65%,穗粒重增加9.08%—140.94%。其他性状无规律性变化;结果表明,ZmZIP1基因能够通过增加穗长,从而使穗粒数增加,最终增加穗粒重,但籽粒厚度有所降低;ZmPHD1基因可以增加籽粒大小,而达到增产的效果。综上所述:ZmZIP1、ZmPHD1基因与产量性状相关,可以作为基础材料应用于高产玉米新品种的选育。
其他文献
行为要围绕既定的目标展开,因而目标的制定尤为关键。从企业发展的角度来说,必须对环境变化、自身特点有清晰的认知,在此基础上确定财务管理目标,以使企业发展更为稳健。当下最为关键的是要针对财务管理目标、财务战略选择展开全面研究。文章主要针对企业财务管理中存在的各种问题进行分析,在此基础上提出可行的解决之策,以期使得企业能够一直保持稳定发展。
20世纪初期,随着艺术歌曲渐渐传入中国,大批优秀的中国艺术歌曲纷至沓来,其中就包括作曲家以中国古诗词为素材,所创作的古诗词艺术歌曲,将中国的古典诗词与现代音乐完美融合,具备较高的艺术研究价值。该文通过对中国古诗词《钗头凤》中“古韵”的挖掘,进而以艺术歌曲的形式进行创新与传播,形成所谓的“今声”。其中“古韵”分为“词韵”和“音韵”,“词韵”指作品的文学内涵与其表达的情感意韵,“音韵”则是指合辙押韵的
医疗行业的发展对医疗器械设备有较高的依赖,随着医疗体制改革的深化,医疗服务市场越发成熟,医疗机构对医疗器械设备的需求快速增长,医疗器械企业迎来发展机遇。医疗器械企业要想抓住发展机遇,获得更多经济收益,就要做好财务管理工作,充分发挥企业财务资源价值。然而,一部分医疗器械企业在财务管理方面存在不足,投融资管理、应收账款管理、税务管理、财务内控、财务绩效评价等方面都有着不同程度的问题,易诱发财务风险。因
敞开式断路器典型故障是由内部填充的绝缘酯性能下降引发瓷套内表面产生沿面放电,最后导致对地闪络击穿,针对该故障的早期甄别缺乏有效检测手段,提出基于声电联合的局部放电检测方法,有效提升断路器内部缺陷检测能力。设计一体式声电联合检测单元,采用交叉定向天线提高射频传感器检测灵敏度,通过有限元法计算检测过程中传感器感应电压以校核其绝缘设计安全性,并通过灰色关联度分析对传感器设计方案进行评估。制作声电联合检测
随着我国人口老龄化进程的不断加快,老年人口数量不断增多。老年人作为社会中的弱势群体,应得到社会工作的重视。临终关怀是为老年人服务的一个重要方面。在介入过程中,社会工作者会面临案主个人权利受法律规定限制、社会价值观念冲突、家庭利益纠纷等方面的伦理困境。为破解该种伦理困境,社会工作者可通过提升自身能力、推动理论观教育、优化决策环境等途径重塑老年临终关怀理论体系。
乡村振兴,规划是基础,全面推进乡村振兴对村庄规划提出了更高要求。文章针对目前村庄规划布局存在的问题,围绕实现乡村振兴目标,重点分析通过规划引领,理清发展思路,进一步确定村庄布局和实现资源共享,对城郊融合型、积聚提升型、特色保护型和搬迁撤并型等不同规划类型提出规划策略。
20世纪初,外来文化如浪潮般涌入中国,“国画改良”、“美术革命”等新思想随之纷至沓来。刘奎龄(1885—1967)是近现代有名的花鸟画家,他以中国传统绘画的精髓为立足点,将西方绘画中的求实精神与日本绘画对色彩的追求融入作品,画面表现既丰富多彩又毫不违和,呈现出独具一格的风格特征,代表了京津地区花鸟画发展的另一面貌。刘奎龄十分注重写生,他在绘画艺术上取得的成就与其手稿的绘制有着密不可分的关系。自学画
在现代教学中,教师和学生在课堂上的地位发生了很大的变化,曾一度以教师讲授为主的课堂逐渐转变成了以学生为主体的课堂教学,学生作为知识的接受者由被动转变为主动,教师也从知识传递者的角色转换成了督促者和引导者。地理教育课程改革也注重学生的主体地位,要求充分发挥学生的主观能动性。角色扮演教学法作为能调动学生积极性的教学方法,是符合和践行地理教育课程改革理念的一种教学方法,通过让学生扮演学习情境中的不同角色
通过对广东中山香山省级自然保护区珍稀濒危植物资源调查发现,香山保护区内共有珍稀濒危植物24种。其中,国家一级重点保护野生植物1种,为紫纹兜兰(Paphiopedilum purpuratum);国家二级重点保护野生植物14种,为土沉香(Aquilaria sinensis)、四药门花(Loropetalum subcordatum)、驼峰藤(Merrillanthus hainanensis)等。